固体培养基如何配制并进行灭菌?

在进行培养基的配制过程中,首先,需要准备配料。在容器中加入少量的蒸馏水或自然水,然后按照配方精确称取各种药品,逐一加入,确保每种药品的剂量准确,取药后立刻盖上瓶盖,以防止水分蒸发。


溶解环节至关重要,特别是含有琼脂的培养基,需要在少量冷水中调成糊状,加热至95~97℃并持续搅拌,防止琼脂烧焦。调PH时,使用1N的盐酸或1N的NaOH,将培养基调整至所需的酸碱度。


接下来是过滤步骤,通过滤纸或棉花进行过滤,确保培养基无杂质。分装时,三角瓶用于静置或摇瓶培养,100ml培养基不能超过250ml的瓶子的150ml,保证空间适宜。试管分装则根据不同类型,液体培养基装入4~5ml,固体斜面培养基装3~4ml。


包扎时,塞上棉塞并用牛皮纸包裹,以防止高温灭菌时水分渗入。进行高压蒸汽灭菌,注意温度和压力要符合配方要求,过高的温度会破坏营养成分,使培养基颜色变深。


灭菌后,需要趁热斜放试管,形成凝固的斜面,占试管长度的一半。最后,将配制好的培养基在30℃下放置一天,如无污染,即可使用,通常存放在4℃冰箱中备用,用牛皮纸密封保存。


扩展资料

培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素,用于单种微生物培养和鉴定。



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