酵母单杂交，双杂交，三杂交都能用来做什么 酵母双杂交的发展
\u9175\u6bcd\u5355\u6742\u4ea4\u8ddf\u53cc\u6742\u4ea4\u7684\u533a\u522b\u5728\u54ea\u91cc\uff1f\u6700\u7b80\u5355\u6700\u901a\u4fd7\u6613\u61c2\u7684\u8bf4\u8bdd\u662f\u4ec0\u4e48\uff1f\u9175\u6bcd\u5355\u6742\u7528\u4e8e\u68c0\u6d4b\u86cb\u767d\u8d28\u548c\u57fa\u56e0\u7684\u5173\u7cfb\u3002\u9175\u6bcd\u53cc\u6742\u7528\u4e8e\u68c0\u6d4b\u86cb\u767d\u8d28\u4e4b\u95f4\u7684\u5173\u7cfb\u3002
\u968f\u7740\u5bf9\u591a\u79cd\u91cd\u8981\u751f\u7269\u7684\u5927\u89c4\u6a21\u57fa\u56e0\u7ec4\u6d4b\u5e8f\u5de5\u4f5c\u7684\u5b8c\u6210\uff0c\u57fa\u56e0\u5de5\u7a0b\u9886\u57df\u53c8\u8fce\u6765\u4e86\u4e00\u4e2a\u65b0\u7684\u65f6\u4ee3---\u529f\u80fd\u57fa\u56e0\u7ec4\u65f6\u4ee3\u3002\u5b83\u7684\u4efb\u52a1\u5c31\u662f\u5bf9\u57fa\u56e0\u7ec4\u4e2d\u5305\u542b\u7684\u5168\u90e8\u57fa\u56e0\u7684\u529f\u80fd\u52a0\u4ee5\u8ba4\u8bc6\u3002\u751f\u7269\u4f53\u7cfb\u7684\u8fd0\u4f5c\u4e0e\u86cb\u767d\u8d28\u4e4b\u95f4\u7684\u4e92\u76f8\u4f5c\u7528\u5bc6\u4e0d\u53ef\u5206\uff0c\u4f8b\u5982\uff1aDNA\u5408\u6210\u3001\u57fa\u56e0\u8f6c\u5f55\u6fc0\u6d3b\u3001\u86cb\u767d\u8d28\u7ffb\u8bd1\u3001\u4fee\u9970\u548c\u5b9a\u4f4d\u4ee5\u53ca\u4fe1\u606f\u4f20\u5bfc\u7b49\u91cd\u8981\u7684\u751f\u7269\u8fc7\u7a0b\u5747\u6d89\u53ca\u5230\u86cb\u767d\u8d28\u590d\u5408\u4f53\u7684\u4f5c\u7528\u3002\u80fd\u591f\u53d1\u73b0\u548c\u9a8c\u8bc1\u5728\u751f\u7269\u4f53\u4e2d\u76f8\u4e92\u4f5c\u7528\u7684\u86cb\u767d\u8d28\u4e0e\u6838\u9178\u3001\u86cb\u767d\u8d28\u4e0e\u86cb\u767d\u8d28\u662f\u8ba4\u8bc6\u5b83\u4eec\u751f\u7269\u5b66\u529f\u80fd\u7684\u7b2c\u4e00\u6b65\u3002\u9175\u6bcd\u53cc\u6742\u4ea4\u6280\u672f\u4f5c\u4e3a\u53d1\u73b0\u548c\u7814\u7a76\u5728\u6d3b\u7ec6\u80de\u4f53\u5185\u7684\u86cb\u767d\u8d28\u4e0e\u86cb\u767d\u8d28\u4e4b\u95f4\u7684\u76f8\u4e92\u4f5c\u7528\u7684\u6280\u672f\u5e73\u53f0\uff0c\u5728\u8fd1\u51e0\u5e74\u6765\u5f97\u5230\u4e86\u5e7f\u6cdb\u8fd0\u7528\u3002\u9175\u6bcd\u53cc\u6742\u4ea4\u7cfb\u7edf\u662f\u5728\u771f\u6838\u6a21\u5f0f\u751f\u7269\u9175\u6bcd\u4e2d\u8fdb\u884c\u7684\uff0c\u7814\u7a76\u6d3b\u7ec6\u80de\u5185\u86cb\u767d\u8d28\u76f8\u4e92\u4f5c\u7528\uff0c\u5bf9\u86cb\u767d\u8d28\u4e4b\u95f4\u5fae\u5f31\u7684\u3001\u77ac\u95f4\u7684\u4f5c\u7528\u4e5f\u80fd\u591f\u901a\u8fc7\u62a5\u544a\u57fa\u56e0\u7684\u8868\u8fbe\u4ea7\u7269\u654f\u611f\u5730\u68c0\u6d4b\u5f97\u5230\uff0c\u5b83\u662f\u4e00\u79cd\u5177\u6709\u5f88\u9ad8\u7075\u654f\u5ea6\u7684\u7814\u7a76\u86cb\u767d\u8d28\u4e4b\u95f4\u5173\u7cfb\u7684\u6280\u672f\u3002\u5927\u91cf\u7684\u7814\u7a76\u6587\u732e\u8868\u660e\uff0c\u9175\u6bcd\u53cc\u6742\u4ea4\u6280\u672f\u65e2\u53ef\u4ee5\u7528\u6765\u7814\u7a76\u54fa\u4e73\u52a8\u7269\u57fa\u56e0\u7ec4\u7f16\u7801\u7684\u86cb\u767d\u8d28\u4e4b\u95f4\u7684\u4e92\u4f5c\uff0c\u4e5f\u53ef\u4ee5\u7528\u6765\u7814\u7a76\u9ad8\u7b49\u690d\u7269\u57fa\u56e0\u7ec4\u7f16\u7801\u7684\u86cb\u767d\u8d28\u4e4b\u95f4\u7684\u4e92\u4f5c\u3002\u56e0\u6b64\uff0c\u5b83\u5728\u8bb8\u591a\u7684\u7814\u7a76\u9886\u57df\u4e2d\u6709\u7740\u5e7f\u6cdb\u7684\u5e94\u7528\u3002\u672c\u6587\u5c31\u9175\u6bcd\u53cc\u6742\u4ea4\u7684\u6280\u672f\u5e73\u53f0\u548c\u5e94\u7528\u52a0\u4ee5\u4ecb\u7ecd\u3002\u9175\u6bcd\u53cc\u6742\u4ea4\u7cfb\u7edf\u7684\u5efa\u7acb\u662f\u57fa\u4e8e\u5bf9\u771f\u6838\u751f\u7269\u8c03\u63a7\u8f6c\u5f55\u8d77\u59cb\u8fc7\u7a0b\u7684\u8ba4\u8bc6\u3002\u7ec6\u80de\u8d77\u59cb\u57fa\u56e0\u8f6c\u5f55\u9700\u8981\u6709\u53cd\u5f0f\u8f6c\u5f55\u6fc0\u6d3b\u56e0\u5b50\u7684\u53c2\u4e0e\u3002\u53cd\u5f0f\u8f6c\u5f55\u6fc0\u6d3b\u56e0\u5b50\uff0c\u4f8b\u5982\u9175\u6bcd\u8f6c\u5f55\u56e0\u5b50GAL4\u5728\u7ed3\u6784\u4e0a\u662f\u7ec4\u4ef6\u5f0f\u7684\uff08modular\uff09\uff0c\u5f80\u5f80\u7531\u4e24\u4e2a\u6216\u4e24\u4e2a\u4ee5\u4e0a\u7ed3\u6784\u4e0a\u53ef\u4ee5\u5206\u5f00\uff0c\u529f\u80fd\u4e0a\u76f8\u4e92\u72ec\u7acb\u7684\u7ed3\u6784\u57df\uff08domain\uff09\u6784\u6210\uff0c\u5176\u4e2d\u6709DNA\u7ed3\u5408\u529f\u80fd\u57df\uff08DNA binding domain,DNA-BD\uff09\u548c\u8f6c\u5f55\u6fc0\u6d3b\u7ed3\u6784\u57df\uff08activation domain\uff0cDNA-AD\uff09\u3002\u8fd9\u4e24\u4e2a\u7ed3\u5408\u57df\u5c06\u5b83\u4eec\u5206\u5f00\u65f6\u4ecd\u5206\u522b\u5177\u6709\u529f\u80fd\uff0c\u4f46\u4e0d\u80fd\u6fc0\u6d3b\u8f6c\u5f55\uff0c\u53ea\u6709\u5f53\u88ab\u5206\u5f00\u7684\u4e24\u8005\u901a\u8fc7\u9002\u5f53\u7684\u9014\u5f84\u5728\u7a7a\u95f4\u4e0a\u8f83\u4e3a\u63a5\u8fd1\u65f6\uff0c\u624d\u80fd\u91cd\u65b0\u5448\u73b0\u5b8c\u6574\u7684GAL4\u8f6c\u5f55\u56e0\u5b50\u6d3b\u6027\uff0c\u5e76\u53ef\u6fc0\u6d3b\u4e0a\u6e38\u6fc0\u6d3b\u5e8f\u5217\uff08upstream activating sequence,UAS\uff09\u7684\u4e0b\u6e38\u542f\u52a8\u5b50\uff0c\u4f7f\u542f\u52a8\u5b50\u4e0b\u6e38\u57fa\u56e0\u5f97\u5230\u8f6c\u5f55\u3002\u6839\u636e\u8fd9\u4e2a\u7279\u6027\uff0c\u5c06\u7f16\u7801DNA-BD\u7684\u57fa\u56e0\u4e0e\u5df2\u77e5\u86cb\u767d\u8d28Bait protein\u7684\u57fa\u56e0\u6784\u5efa\u5728\u540c\u4e00\u4e2a\u8868\u8fbe\u8f7d\u4f53\u4e0a\uff0c\u5728\u9175\u6bcd\u4e2d\u8868\u8fbe\u4e24\u8005\u7684\u878d\u5408\u86cb\u767dBD-Bait protein\u3002\u5c06\u7f16\u7801AD\u7684\u57fa\u56e0\u548ccDNA\u6587\u5e93\u7684\u57fa\u56e0\u6784\u5efa\u5728AD-LIBRARY\u8868\u8fbe\u8f7d\u4f53\u4e0a\u3002\u540c\u65f6\u5c06\u4e0a\u8ff0\u4e24\u79cd\u8f7d\u4f53\u8f6c\u5316\u6539\u9020\u540e\u7684\u9175\u6bcd\uff0c\u8fd9\u79cd\u6539\u9020\u540e\u7684\u9175\u6bcd\u7ec6\u80de\u7684\u57fa\u56e0\u7ec4\u4e2d\u65e2\u4e0d\u80fd\u4ea7\u751fGAL4\uff0c\u53c8\u4e0d\u80fd\u5408\u6210LEU\u3001TRP\u3001HIS\u3001ADE\uff0c\u56e0\u6b64\uff0c\u9175\u6bcd\u5728\u7f3a\u4e4f\u8fd9\u4e9b\u8425\u517b\u7684\u57f9\u517b\u57fa\u4e0a\u65e0\u6cd5\u6b63\u5e38\u751f\u957f\u3002\u5f53\u4e0a\u8ff0\u4e24\u79cd\u8f7d\u4f53\u6240\u8868\u8fbe\u7684\u878d\u5408\u86cb\u767d\u80fd\u591f\u76f8\u4e92\u4f5c\u7528\u65f6\uff0c\u529f\u80fd\u91cd\u5efa\u7684\u53cd\u5f0f\u4f5c\u7528\u56e0\u5b50\u80fd\u591f\u6fc0\u6d3b\u9175\u6bcd\u57fa\u56e0\u7ec4\u4e2d\u7684\u62a5\u544a\u57fa\u56e0HIS\u3001ADE\u3001LACZ\u3001MEL1\uff0c\u4ece\u800c\u901a\u8fc7\u529f\u80fd\u4e92\u8865\u548c\u663e\u8272\u53cd\u5e94\u7b5b\u9009\u5230\u9633\u6027\u83cc\u843d\u3002\u5c06\u9633\u6027\u53cd\u5e94\u7684\u9175\u6bcd\u83cc\u682a\u4e2d\u7684AD-LIBRARY\u8f7d\u4f53\u63d0\u53d6\u5206\u79bb\u51fa\u6765\uff0c\u4ece\u800c\u5bf9\u8f7d\u4f53\u4e2d\u63d2\u5165\u7684\u6587\u5e93\u57fa\u56e0\u8fdb\u884c\u6d4b\u5e8f\u548c\u5206\u6790\u5de5\u4f5c\u3002\u5728\u9175\u6bcd\u53cc\u6742\u4ea4\u7684\u57fa\u7840\u4e0a\uff0c\u53c8\u53d1\u5c55\u51fa\u4e86\u9175\u6bcd\u5355\u6742\u4ea4\u3001\u9175\u6bcd\u4e09\u6742\u4ea4\u548c\u9175\u6bcd\u7684\u53cd\u5411\u6742\u4ea4\u6280\u672f\u3002\u5b83\u4eec\u88ab\u5206\u522b\u7528\u4e8e\u6838\u9178\u548c\u6587\u5e93\u86cb\u767d\u4e4b\u95f4\u7684\u7814\u7a76\u3001\u4e09\u79cd\u4e0d\u540c\u86cb\u767d\u4e4b\u95f4\u7684\u4e92\u4f5c\u7814\u7a76\u548c\u4e24\u79cd\u86cb\u767d\u76f8\u4e92\u4f5c\u7528\u7684\u7ed3\u6784\u548c\u4f4d\u70b9\u3002
但存在一定误区
单杂交确实是研究蛋白质与DNA特定序列相互作用的
双杂交也是研究蛋白蛋白相互作用的
不过三杂交就比较复杂了
三杂交有很多种变形
但最基本的是为了研究RNA和蛋白质之间的相互作用的
在部分论文中，还出现RNA，cDNA等元件作为连接点，
所以不该是研究蛋白质蛋白质相互作用的
不过，通过RNA或者DNA和相互连接的两个蛋白质（虽然略扯淡）
又何尝不是种相互作用呢
所以我在这只是补充一下而已
单杂交研究细胞内蛋白质与DNA的特定序列间的相互作用
双杂交，三杂交研究细胞内蛋白质与蛋白质之间的相互作用
绛旓細鍗曟潅浜鐮旂┒缁嗚優鍐呰泲鐧借川涓嶥NA鐨勭壒瀹氬簭鍒楅棿鐨勭浉浜掍綔鐢 鍙屾潅浜,涓夋潅浜鐮旂┒缁嗚優鍐呰泲鐧借川涓庤泲鐧借川涔嬮棿鐨勭浉浜掍綔鐢
绛旓細鍗曟潅浜纭疄鏄爺绌惰泲鐧借川涓嶥NA鐗瑰畾搴忓垪鐩镐簰浣滅敤鐨 鍙屾潅浜涔熸槸鐮旂┒铔嬬櫧铔嬬櫧鐩镐簰浣滅敤鐨 涓嶈繃涓夋潅浜灏辨瘮杈冨鏉備簡 涓夋潅浜ゆ湁寰堝绉嶅彉褰 浣嗘渶鍩烘湰鐨勬槸涓轰簡鐮旂┒RNA鍜岃泲鐧借川涔嬮棿鐨勭浉浜掍綔鐢ㄧ殑 鍦ㄩ儴鍒嗚鏂囦腑锛岃繕鍑虹幇RNA锛宑DNA绛夊厓浠朵綔涓鸿繛鎺ョ偣锛屾墍浠ヤ笉璇ユ槸鐮旂┒铔嬬櫧璐ㄨ泲鐧借川鐩镐簰浣滅敤鐨 涓嶈繃锛岄氳繃RNA鎴栬匘NA鍜岀浉浜掕繛鎺ョ殑...
绛旓細閰垫瘝鍗曟潅浜锛坹east one hybrid锛夋槸鍦ㄩ叺姣鍙屾潅浜鐨勫熀纭涓婂彂灞曡捣鏉ョ殑鎶鏈紝涓昏鐢ㄤ簬鐮旂┒铔嬬櫧璐ㄥ拰DNA鍏冧欢涔嬮棿鐨勭浉浜掍綔鐢ㄣ傜湡鏍哥敓鐗╁熀鍥犵殑杞綍璧峰闇杞綍鍥犲瓙鍙備笌锛岃浆褰曞洜瀛愰氬父鐢变竴涓狣NA鐗瑰紓鎬х粨鍚堝姛鑳藉煙鍜屼竴涓垨澶氫釜鍏朵粬璋冩帶铔嬬櫧鐩镐簰浣滅敤鐨勬縺娲诲姛鑳藉煙缁勬垚锛屽嵆DNA缁撳悎缁撴瀯鍩燂紙DNA-bindingdomain BD锛夊拰杞綍婵娲荤粨...
绛旓細閰垫瘝鍗曟潅浜鎶鏈渶鏃╂槸1993骞寸敱Li et al [1,2]浠庨叺姣鍙屾潅浜鎶鏈彂灞曡屾潵锛岄叺姣嶅弻鏉備氦鎶鏈氳繃瀵规姤鍛婂熀鍥犵殑琛ㄥ瀷杩涜妫娴嬩互瀹炵幇瀵硅泲鐧借川闂寸浉浜掍綔鐢ㄧ殑鐮旂┒[3-6]锛岃岄叺姣嶅崟鏉備氦鎶鏈垯閫氳繃瀵规姤鍛婂熀鍥犵殑琛ㄥ瀷妫娴嬶紝鍒嗘瀽DNA銆佽泲鐧戒箣闂寸殑鐩镐簰浣滅敤锛屼互鐮旂┒鐪熸牳缁嗚優鍐呯殑鍩哄洜琛ㄨ揪璋冩帶.鐩墠璁や负鐪熸牳鐢熺墿鐨勮浆褰曡捣濮嬮渶瑕...
绛旓細閰垫瘝鍗曟潅浜绯荤粺鍜鍙屾潅浜绯荤粺鏄袱绉嶅父鐢ㄧ殑铔嬬櫧璐ㄧ浉浜掍綔鐢ㄦ娴嬫柟娉曪紝瀹冧滑鐨勪富瑕佸尯鍒湪浜庢娴嬬殑鍘熺悊鍜屽簲鐢ㄨ寖鍥翠笉鍚屻傞叺姣嶅崟鏉備氦绯荤粺Y1H锛圷east One Hybrid System锛夌敤浜庡彂鐜癉NA搴忓垪涓庤浆褰曞洜瀛愮粨鍚堢殑鎶鏈傝绯荤粺閫氳繃灏嗘劅鍏磋叮鐨凞NA搴忓垪鎻掑叆鍒板惎鍔ㄥ瓙涓婃父鐨勫惎鍔ㄥ瓙娲诲寲鍖哄煙AD锛圓ctivation Domain锛夋墍缂栫爜鐨勬姤鍛婂熀鍥犲墠锛...
绛旓細鎵浠ュ湪鍩哄洜宸ョ▼涓畠澶氫細琚夋嫨鎴愪负鍙椾綋銆傜浉浼肩殑杩樻湁澶ц偁鏉嗚弻銆 璇勮| 2013-09-27 12:28灏忕背閿呭反love|浜岀骇 閰垫瘝鑿屾槸涓绉嶆ā寮忕敓鐗,鐩墠鍏跺叏鍩哄洜缁勫簭鍒楀凡缁忕牬璇,閰垫瘝浜哄伐鏌撹壊浣撹浇浣撴槸涓绉嶅ぇ瀹归噺鐨勮浇浣,閰垫瘝鍙屾潅浜绯荤粺,鍗曟潅浜绯荤粺浠ュ強涓夋潅浜绯荤粺閮芥槸鍩哄洜宸ョ▼涓殑甯哥敤鎶鏈墜娈 璇勮|鍩哄洜宸ョ▼鐨勭浉鍏崇煡璇...
绛旓細灏忛厤浣-鍙椾綋鐩镐簰浣滅敤鏄敓鐗╁涓澶氬熀鏈繃绋嬬殑鍩虹锛屼篃鏄尰瀛︿笂瀵逛汉绫荤柧鐥呰繘琛岃嵂鐗╁共棰勭殑鍩虹銆傛垜浠湪姝ゆ姤閬撲簡涓绉嶉仐浼犵郴缁燂紝绉颁负閰垫瘝涓夋潅浜绯荤粺锛岀敤浜庢娴嬩綋鍐呴厤浣-鍙椾綋鐨勭浉浜掍綔鐢ㄣ傝绯荤粺鏀圭紪鑷閰垫瘝鍙屾潅浜绯荤粺锛屽叾涓粨鍚堜簡绗笁绉嶅悎鎴愭潅浜ら厤浣擄紝浠ュ湴濉炵背鏉惧拰FK506鍏变环杩炴帴鐨勫紓婧愪簩鑱氫綋浣滀负鏉傚悎閰嶄綋锛岄獙璇佷簡璇...
绛旓細閰垫瘝鑿屽父浣滀负鍩哄洜宸ョ▼鍙椾綋锛岀壒鎬ф槸锛1.鍏锋湁鐪熸牳鐢熺墿鐨勭壒寰侊紝閬椾紶鑳屾櫙娓呮锛岀敓闀胯繀閫燂紝鍩瑰吇绠鍗曪紝澶栨簮鍩哄洜琛ㄨ揪绯荤粺瀹屽杽锛岄仐浼犵ǔ瀹氾紱2.鍐呮簮鎬ц泲鐧戒骇鐗╃绫荤箒澶氫笖鍚噺楂橈紱3.閫傜敤浜庡婧怐NA鐨勬墿澧炪佸厠闅嗕互鍙婄湡鏍哥敓鐗╁熀鍥犵殑楂樻晥琛ㄨ揪銆佸熀鍥犳枃搴撶殑鏋勫缓銆佺湡鏍哥敓鐗╁熀鍥犺〃杈捐皟鎺х殑鐮旂┒锛屾槸DNA閲嶇粍瀹為獙鍜屽熀鍥犲伐绋嬮噸瑕佺殑鐪...
绛旓細閰垫瘝鍗曟潅浜鎶鏈渶鏃╂槸1993骞寸敱Li绛変粠閰垫瘝鍙屾潅浜鎶鏈彂灞曡屾潵锛岄氳繃瀵规姤鍛婂熀鍥犵殑琛ㄥ瀷妫娴嬶紝鍒嗘瀽DNA涓庤泲鐧戒箣闂寸殑鐩镐簰浣滅敤锛屼互鐮旂┒鐪熸牳缁嗚優鍐呯殑鍩哄洜琛ㄨ揪璋冩帶銆傜敱浜庨叺姣嶅崟鏉備氦鏂规硶妫娴嬬壒瀹氳浆褰曞洜瀛愪笌椤哄紡浣滅敤鍏冧欢涓撲竴鎬х浉浜掍綔鐢ㄧ殑鏁忔劅鎬у拰鍙潬鎬э紝鐜板凡琚箍娉涚敤浜庡厠闅嗙粏鑳炰腑鍚噺寰急鐨勩佺敤鐢熷寲鎵嬫闅句互绾寲鐨勭壒瀹氳浆褰...
绛旓細灏嗚繖绉嶆妧鏈井閲忓寲銆侀樀鍒楀寲鍚庡垯鍙敤浜庡ぇ 瑙勬ā铔嬬櫧璐ㄤ箣闂寸浉浜掍綔鐢ㄧ殑鐮旂┒銆傚湪瀹為檯宸ヤ綔涓紝浜轰滑鏍规嵁闇瑕佸彂灞曚簡鍗曟潅浜绯荤粺銆涓夋潅浜绯荤粺鍜屽弽鍚戞潅浜ょ郴缁熺瓑銆侫ngermayr绛夎璁′簡涓涓猄OS铔嬬櫧浠 瀵肩殑鍙屾潅浜ょ郴缁熴傚彲浠ョ爺绌惰啘铔嬬櫧鐨勫姛鑳斤紝涓板瘜浜閰垫瘝鍙屾潅浜绯荤粺鐨勫姛鑳姐傛澶栵紝閰垫瘝鍙屾潅浜ょ郴缁熺殑浣滅敤涔熷凡鎵╁睍鑷冲铔嬬櫧璐ㄧ殑...
