高效液相色谱仪的色谱柱堵塞了怎么解决? 高效液相色谱法常出现的故障及解决的方法

\u8c01\u80fd\u5e2e\u5e2e\u6211\uff0c\u9ad8\u6548\u6db2\u76f8\u8272\u8c31\u4eea\u7684\u67f1\u5b50\u5835\u4e86\uff0c\u600e\u4e48\u51b2\u6d17?\u8c22\u8c22\u4e86

\u662f\u600e\u4e48\u88ab\u5835\u7684\uff1f\u5982\u679c\u662f\u76d0\u6790\u88ab\u5835\uff0c\u53ef\u4ee5\u752895% \u7684\u6c34\u4f4e\u6d41\u901f\u51b2\uff0c \u51b2\u6d17\u7684\u65f6\u5019\u53ef\u4ee5\u5c06\u67f1\u6e29\u7565\u5fae\u8bbe\u9ad8\u4e00\u70b9\uff0c\u6709\u5229\u4e8e\u76d0\u6eb6\u89e3\uff0c\u6216\u662f\u5148\u7528100%\u6c34\u51b2\uff08\u53ea\u80fd\u77ed\u65f6\u95f4\u51b2\uff0c\u4e8c\u4e09\u5341\u5206\u949f\uff0c\u65f6\u95f4\u957f\u4f1a\u635f\u574f\u67f1\u5b50\uff09\uff0c\u518d\u7528\u542b\u6709\u673a\u76f8\u7684\u6c34\u51b2\u3002\u5982\u679c\u662f\u957f\u65f6\u95f4\u8d70\u6837\uff0c\u6837\u54c1\u4e2d\u7684\u56fa\u4f53\u5c0f\u9897\u7c92\u5835\u4e86\u67f1\u5b50\uff0c\u4e5f\u53ea\u80fd\u53cd\u51b2\u4e86\u3002\u6709\u4e9b\u67f1\u5b50\u53cd\u51b2\u4e4b\u540e\u5c31\u53ea\u80fd\u5012\u8fc7\u6765\u7528\u4e86\uff0c\u6240\u4ee5\u9700\u8c28\u614e\uff0c\u6700\u597d\u6253\u7535\u8bdd\u54a8\u8be2\u4e0b\u5de5\u7a0b\u5e08\uff08\u6700\u597d\u5e73\u65f6\u4f7f\u7528\u65f6\u52a0\u4e0a\u4fdd\u62a4\u67f1\uff0c\u76f8\u5bf9\u4e8e\u8272\u8c31\u67f1\uff0c\u6ee4\u82af\u8fd8\u662f\u4fbf\u5b9c\u5f88\u591a\u7684\uff09\u3002

\u9ad8\u6548\u6db2\u76f8\u8272\u8c31\u4eea\u4f7f\u7528\u4e2d\u5e38\u89c1\u6545\u969c\u53ca\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5 \u9ad8\u6548\u6db2\u76f8\u8272\u8c31\u4eea\u4f7f\u7528\u4e2d\u5e38\u89c1\u6545\u969c\u53ca\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5 \u9ad8\u6548\u6db2\u76f8\u8272\u8c31\u4eea\u4f7f\u7528\u4e2d\u5e38\u89c1\u6545\u969c\u53ca\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5
1 \u6982\u8ff0\u3002\u9ad8\u6548\u6db2\u76f8\u8272\u8c31\u4eea\u7cfb\u7edf\u6db2\u76f8\u8272\u8c31\u4eea\u4e3b\u8981\u7531\u8d2e\u6db2\u74f6\u3001\u6cf5\u3001\u8fdb\u6837\u5668\u3001\u67f1\u5b50\u3001\u67f1
\u6e29\u7bb1\u3001\u68c0\u6d4b\u5668\u3001\u6570\u636e\u5904\u7406\u7cfb\u7edf\u7ec4\u6210\u3002\u5bf9\u4e8e\u6574\u4e2a\u7cfb\u7edf\u800c\u8a00\uff0c\u67f1\u5b50\u3001\u6cf5\u548c\u68c0\u6d4b\u5668\u662f\u6838
\u5fc3\u90e8\u4ef6\u540c\u65f6\u4e5f\u662f\u6613\u51fa\u95ee\u9898\u7684\u4e3b\u8981\u90e8\u4f4d\u3002
2 \u5e38\u89c1\u95ee\u9898\u53ca\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5\u3002\u9ad8\u6548\u6db2\u76f8\u4f5c\u4e3a\u4e00\u79cd\u9ad8\u7cbe\u5bc6\u4eea\u5668\uff0c\u5982\u679c\u5728\u4f7f\u7528\u8fc7\u7a0b\u4e2d\u4e0d\u6309
\u7167\u6b63\u786e\u64cd\u4f5c\u7684\u8bdd\uff0c\u5c31\u5bb9\u6613\u5bfc\u81f4\u4e00\u4e9b\u95ee\u9898\u3002\u5176\u4e2d\u6700\u5e38\u89c1\u7684\u5c31\u662f\u67f1\u538b\u95ee\u9898\u3001\u6f02\u79fb\u95ee\u9898\u3001
\u5cf0\u578b\u5f02\u5e38\u95ee\u9898\u3002
2.1 \u67f1\u538b\u95ee\u9898\u3002\u67f1\u538b\u95ee\u9898\u662f\u4f7f\u7528\u9ad8\u6548\u6db2\u76f8\u8272\u8c31\u8fc7\u7a0b\u4e2d\u9700\u8981\u5bc6\u5207\u6ce8\u610f\u7684\u5730\u65b9\uff0c\u67f1\u538b
\u7684\u7a33\u5b9a\u4e0e\u8272\u8c31\u56fe\u5cf0\u5f62\u7684\u597d\u574f\u3001\u67f1\u6548\u3001\u5206\u79bb\u6548\u679c\u53ca\u4fdd\u7559\u65f6\u95f4\u7b49\u5bc6\u5207\u76f8\u5173\u3002\u6240\u8c13\u67f1\u538b
\u7a33\u5b9a\u5e76\u4e0d\u662f\u6307\u538b\u529b\u503c\u7a33\u5b9a\u4e8e\u4e00\u4e2a\u6052\u5b9a\u503c\u800c\u662f\u6307\u538b\u529b\u6ce2\u52a8\u8303\u56f4\u572850PSI\uff083.3 Bar\uff09
\u4e4b\u95f4\uff08\u5728\u4f7f\u7528\u68af\u5ea6\u6d17\u8131\u65f6\uff0c\u67f1\u538b\u5e73\u7a33\u7f13\u6162\u7684\u53d8\u5316\u662f\u5141\u8bb8\u7684\uff09\u3002\u538b\u529b\u8fc7\u9ad8\u3001\u8fc7\u4f4e\u90fd
\u5c5e\u4e8e\u67f1\u538b\u95ee\u9898\u3002
2.1.1 \u538b\u529b\u8fc7\u9ad8\u3002\u8fd9\u662f\u9ad8\u6548\u6db2\u76f8\u5728\u4f7f\u7528\u4e2d\u6700\u5e38\u89c1\u7684\u95ee\u9898\uff0c\u6307\u7684\u662f\u538b\u529b\u7a81\u7136\u5347\u9ad8\uff0c
\u4e00\u822c\u90fd\u662f\u7531\u4e8e\u6d41\u8def\u4e2d\u6709\u5835\u585e\u7684\u539f\u56e0\u3002\u6b64\u65f6\uff0c\u6211\u4eec\u5e94\u8be5\u5206\u6bb5\u8fdb\u884c\u68c0\u67e5\u3002(1).\u9996\u5148\u65ad
\u5f00\u771f\u7a7a\u6cf5\u7684\u5165\u53e3\u5904\uff0c\u6b64\u65f6PEEK\u7ba1\u91cc\u5145\u6ee1\u6db2\u4f53\uff0c\u4f7fPEEK\u7ba1\u4f4e\u4e8e\u6eb6\u5242\u74f6\uff0c\u770b\u6db2\u4f53\u662f\u5426
\u81ea\u7531\u6ef4\u4e0b\uff0c\u5982\u679c\u6db2\u4f53\u4e0d\u6ef4\u6216\u7f13\u6162\u6ef4\u4e0b\uff0c\u5219\u662f\u6eb6\u5242\u8fc7\u6ee4\u5934\u5835\u585e\u3002\u5904\u7406\u65b9\u6cd5\uff1a\u752830%
\u7684\u785d\u9178\u6d78\u6ce1\u534a\u4e2a\u5c0f\u65f6\uff0c\u5728\u7528\u8d85\u7eaf\u6c34\u51b2\u6d17\u5e72\u51c0\u3002\u5982\u679c\u6db2\u4f53\u81ea\u7531\u6ef4\u4e0b\uff0c\u6eb6\u5242\u8fc7\u6ee4\u5934\u6b63
\u5e38\uff0c\u5728\u68c0\u67e5\uff1b (2).\u6253\u5f00Purge\u9600\uff0c\u4f7f\u6d41\u52a8\u76f8\u4e0d\u7ecf\u8fc7\u67f1\u5b50\uff0c\u5982\u679c\u538b\u529b\u6ca1\u6709\u660e\u663e\u4e0b\u964d\uff0c
\u5219\u662f\u8fc7\u6ee4\u767d\u5934\u5835\u585e\u3002\u5904\u7406\u65b9\u6cd5\uff1a\u5c06\u8fc7\u6ee4\u767d\u5934\u53d6\u51fa\uff0c\u752810%\u7684\u5f02\u4e19\u9187\u8d85\u58f0\u534a\u4e2a\u5c0f\u65f6\u3002
\u5982\u679c\u538b\u529b\u964d\u81f3100PSI (6.7 Bar)\u4ee5\u4e0b\uff0c\u8fc7\u6ee4\u767d\u5934\u6b63\u5e38\uff0c\u5728\u68c0\u67e5\uff1b (3).\u628a\u8272\u8c31\u67f1
\u51fa\u53e3\u7aef\u53d6\u4e0b\uff0c\u5982\u679c\u538b\u529b\u4e0d\u4e0b\u964d\uff0c\u5219\u662f\u67f1\u5b50\u5835\u585e\u3002\u5904\u7406\u65b9\u6cd5\uff1a\u5982\u679c\u662f\u7f13\u51b2\u76d0\u5835\u585e\uff0c
\u5219\u752895%\u7684\u6c34\u51b2\u81f3\u538b\u529b\u6b63\u5e38\u3002\u5982\u679c\u662f\u4e00\u4e9b\u5f3a\u4fdd\u7559\u7684\u7269\u8d28\u5bfc\u81f4\u5835\u585e\uff0c\u5219\u8981\u7528\u6bd4\u73b0\u5728
\u6d41\u52a8\u76f8\u66f4\u5f3a\u7684\u6d41\u52a8\u76f8\u51b2\u81f3\u538b\u529b\u6b63\u5e38\u3002\u5047\u5982\u6309\u4e0a\u9762\u7684\u65b9\u6cd5\u957f\u65f6\u95f4\u51b2\u6d17\u538b\u529b\u90fd\u4e0d\u4e0b
\u964d\uff0c\u5219\u53ef\u8003\u8651\u5c06\u67f1\u5b50\u7684\u8fdb\u51fa\u53e3\u53cd\u8fc7\u6765\u63a5\u5728\u4eea\u5668\u4e0a\uff0c\u7528\u6d41\u52a8\u76f8\u51b2\u6d17\u67f1\u5b50\u3002\u8fd9\u65f6\uff0c\u5982
\u679c\u67f1\u538b\u4ecd\u4e0d\u4e0b\u964d\uff0c\u53ea\u6709\u6362\u67f1\u5b50\u5165\u53e3\u7b5b\u677f\uff0c\u4f46\u4e00\u65e6\u64cd\u4f5c\u4e0d\u751a\uff0c\u5f88\u5bb9\u6613\u9020\u6210\u67f1\u6548\u4e0b\u964d\uff0c
\u6240\u4ee5\u5c3d\u91cf\u5c11\u7528\u3002
2.1.2 \u538b\u529b\u8fc7\u4f4e\u3002\u538b\u529b\u8fc7\u4f4e\u7684\u73b0\u8c61\u4e00\u822c\u662f\u7531\u4e8e\u7cfb\u7edf\u6cc4\u6f0f\uff0c\u5904\u7406\u65b9\u6cd5\uff1a\u5bfb\u627e\u5404\u4e2a\u63a5
\u53e3\u5904\uff0c\u7279\u522b\u662f\u8272\u8c31\u67f1\u4e24\u7aef\u7684\u63a5\u53e3\uff0c\u628a\u6cc4\u6f0f\u7684\u5730\u65b9\u65cb\u7d27\u5373\u53ef\u3002\u5f53\u7136\u8fd8\u6709\u4e00\u4e2a\u539f\u56e0\u5c31
\u662f\u6cf5\u91cc\u8fdb\u4e86\u7a7a\u6c14\uff0c\u4f46\u6b64\u65f6\u8868\u73b0\u7684\u5f80\u5f80\u662f\u538b\u529b\u4e0d\u7a33\uff0c\u5ffd\u9ad8\u5ffd\u4f4e\uff0c\u66f4\u4e25\u91cd\u4e00\u70b9\u4f1a\u5bfc\u81f4
\u6cf5\u65e0\u6cd5\u5438\u4e0a\u6db2\u4f53\u3002\u5904\u7406\u65b9\u6cd5\uff1a\u6253\u5f00Purge\u9600\uff0c\u75283~5ml/min\u7684\u6d41\u901f\u51b2\u6d17\uff0c\u5982\u679c\u4e0d\u884c\uff0c
\u5219\u8981\u7528\u4e13\u7528\u9488\u7b52\u5728\u6392\u7a7a\u9600\u5904\u501f\u4f4f\u5916\u529b\u5c06\u6c14\u6ce1\u5438\u51fa\u3002
2.2\uff0e\u6f02\u79fb\u95ee\u9898\u4e3b\u8981\u5305\u62ec\u57fa\u7ebf\u6f02\u79fb\u548c\u4fdd\u7559\u65f6\u95f4\u6f02\u79fb\u3002
2.2.1\u57fa\u7ebf\u6f02\u79fb\u3002\u4e00\u822c\u8bf4\u6765\uff0c\u673a\u5668\u521a\u8d77\u52a8\u65f6\uff0c\u57fa\u7ebf\u5bb9\u6613\u6f02\u79fb\uff0c\u5927\u6982\u8981\u534a\u4e2a\u5c0f\u65f6\u7684
\u5e73\u8861\u65f6\u95f4\uff0c\u5982\u679c\u4f60\u7528\u4e86\u7f13\u51b2\u6eb6\u6db2\u6216\u7f13\u51b2\u76d0\uff0c\u8fd8\u6709\u5c31\u662f\u5728\u4f4e\u6ce2\u957f\u4e0b\uff08220nm\uff09\u5e73\u8861
\u65f6\u95f4\u76f8\u5bf9\u4f1a\u6bd4\u8f83\u957f\uff0c\u4f46\u5982\u679c\u4f60\u5728\u5b9e\u9a8c\u8fc7\u7a0b\u4e2d\u53d1\u73b0\u57fa\u7ebf\u6f02\u79fb\uff0c\u5219\u4f60\u8981\u8003\u8651\u4e0b\u9762\u7684\u539f
\u56e0\uff1a 1\u3001\u67f1\u6e29\u6ce2\u52a8\u3002\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5\uff1a\u63a7\u5236\u597d\u67f1\u5b50\u548c\u6d41\u52a8\u76f8\u7684\u6e29\u5ea6\uff0c\u68c0\u67e5\u662f\u5426\u6709\u6253\u5f00\u7684
\u7a97\u6237\u6216\u7a7a\u8c03\u5bf9\u7740\u67f1\u6e29\u7bb1\u30022\u3001\u6d41\u901a\u6c60\u88ab\u6c61\u67d3\u6216\u6709\u6c14\u4f53\u3002\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5\uff1a\u7528\u7532\u9187\u6216\u5176\u4ed6
\u5f3a\u6781\u6027\u6eb6\u5242\u51b2\u6d17\u6d41\u901a\u6c60\uff08\u6700\u597d\u65ad\u5f00\u67f1\u5b50\uff09\u3002\u5982\u6709\u9700\u8981\uff0c\u53ef\u4ee5\u75281N\u7684\u785d\u9178\uff08\u4e0d\u8981\u7528
\u76d0\u9178\uff09\u30023\u3001\u7d2b\u5916\u706f\u80fd\u91cf\u4e0d\u8db3\u3002\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5\uff1a\u66f4\u6362\u65b0\u7684\u7d2b\u5916\u706f4\u3001\u6d41\u52a8\u76f8\u6c61\u67d3\u3001\u53d8\u8d28
\u6216\u7531\u4f4e\u54c1\u8d28\u6eb6\u5242\u914d\u6210\u3002\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5\uff1a\u68c0\u67e5\u6d41\u52a8\u76f8\u7684\u7ec4\u6210\uff0c\u4f7f\u7528\u9ad8\u54c1\u8d28\u7684\u5316\u5b66\u8bd5\u5242\u53ca
HPLC\u7ea7\u7684\u6eb6\u5242\u30025\u3001\u6837\u54c1\u4e2d\u6709\u5f3a\u4fdd\u7559\u7684\u7269\u8d28\uff08\u9ad8K\u2019\u503c\uff09\u4ee5\u9992\u5934\u5cf0\u6837\u88ab\u6d17\u8131\u51fa\uff0c\u4ece\u800c\u8868\u73b0\u51fa\u4e00\u4e2a\u9010\u6b65\u5347\u9ad8\u7684\u57fa\u7ebf\u3002\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5\uff1a\u4f7f\u7528\u4fdd\u62a4\u67f1\uff0c\u5982\u6709\u5fc5\u8981\uff0c\u5728\u8fdb\u6837\u4e4b\u95f4\u3002
\u5728\u5206\u6790\u8fc7\u7a0b\u4e2d\uff0c\u5b9a\u671f\u7528\u5f3a\u6eb6\u5242\u51b2\u6d17\u67f1\u5b50\u30026\u3001\u68c0\u6d4b\u5668\u6ca1\u6709\u8bbe\u5b9a\u5728\u6700\u5927\u5438\u6536\u6ce2\u957f\u5904\u3002
\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5\uff1a\u5c06\u6ce2\u957f\u8c03\u6574\u81f3\u6700\u5927\u5438\u6536\u6ce2\u957f\u59047\u3001\u6d41\u52a8\u76f8\u7684PH\u503c\u6ca1\u6709\u8c03\u8282\u597d\u3002\u89e3\u51b3\u65b9
\u6cd5\uff1a\u52a0\u9002\u91cf\u7684\u9178\u6216\u78b1\u8c03\u81f3\u6700\u4f73PH\u503c
2.2.2 \u4fdd\u7559\u65f6\u95f4\u6f02\u79fb\u3002\u4fdd\u7559\u65f6\u95f4\u91cd\u73b0\u662f\u6db2\u76f8\u6027\u80fd\u597d\u574f\u7684\u4e00\u4e2a\u91cd\u8981\u6807\u5fd7\uff0c\u540c\u4e00\u79cd\u4e1c
\u897f\uff0c\u4e24\u6b21\u7684\u4fdd\u7559\u65f6\u95f4\u76f8\u5dee\u4e0d\u8981\u8d85\u8fc7 15s\uff0c\u8d85\u8fc7\u4e86\u534a\u5206\u949f\u53ef\u770b\u505a\u4fdd\u7559\u65f6\u95f4\u6f02\u79fb\uff0c\u5c31
\u65e0\u6cd5\u8fdb\u884c\u5b9a\u6027\uff0c\u4f60\u8981\u8003\u8651\u4ee5\u4e0b\u539f\u56e0\uff1a 1\u3001\u6e29\u63a7\u4e0d\u5f53\u3002\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5\uff1a\u8c03\u597d\u67f1\u6e29\uff0c\u68c0\u67e5
\u662f\u5426\u6709\u6253\u5f00\u7684\u7a97\u6237\u6216\u7a7a\u8c03\u5bf9\u7740\u67f1\u6e29\u7bb1\u30022\u3001\u6d41\u52a8\u76f8\u6bd4\u4f8b\u53d8\u5316\u3002\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5\uff1a\u68c0\u67e5\u56db
\u5143\u6cf5\u7684\u6bd4\u4f8b\u9600\u662f\u5426\u6709\u6545\u969c 3\u3001\u8272\u8c31\u67f1\u6ca1\u6709\u5e73\u8861\u3002\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5\uff1a\u5728\u6bcf\u4e00\u6b21\u8fd0\u884c\u4e4b\u524d\u7ed9
\u4e88\u8db3\u591f\u7684\u65f6\u95f4\u5e73\u8861\u8272\u8c31\u67f1 4\u3001\u6d41\u901f\u53d8\u5316\u3002\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5\uff1a\u91cd\u65b0\u8bbe\u5b9a\u6d41\u901f 5\u3001\u6cf5\u4e2d\u6709\u6c14
\u6ce1\u3002\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5\uff1a\u3001 \u4ece\u6cf5\u4e2d\u9664\u53bb\u6c14\u6ce1 2.3 \u5cf0\u578b\u5f02\u5e38\u95ee\u9898\u5cf0\u578b\u95ee\u9898\u662f\u6db2\u76f8\u7684\u4e3b\u8981\u95ee\u9898\uff0c
\u5728\u505a\u6db2\u76f8\u8fc7\u7a0b\u4e2d\uff0c\u6211\u4eec\u5c31\u662f\u8981\u53d8\u6362\u4e0d\u540c\u7684\u6761\u4ef6\u6765\u6539\u5584\u4e0d\u597d\u7684\u5cf0\u578b\uff0c\u5bf9\u4e8e\u5404\u79cd\u5404\u6837
\u7684\u5f02\u5e38\u5cf0\uff0c\u8981\u533a\u522b\u5bf9\u5f85\uff0c\u4ece\u4e3b\u8981\u95ee\u9898\u51fa\u53d1\uff0c\u4e00\u4e2a\u4e00\u4e2a\u52a0\u4ee5\u89e3\u51b3\u30021\u3001\u8272\u8c31\u56fe\u4e2d\u672a
\u51fa\u5cf0\u3002\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5\uff1a\u7cfb\u7edf\u672a\u8fdb\u6837\u6216\u6837\u54c1\u5206\u89e3\uff1b\u6cf5\u672a\u8f93\u6db2\u6216\u6d41\u52a8\u76f8\u4f7f\u7528\u4e0d\u6b63\u786e\uff1b\u68c0\u6d4b
\u5668\u8bbe\u7f6e\u4e0d\u6b63\u786e\uff1b\u9488\u5bf9\u4ee5\u4e0a\u60c5\u51b5\u6210\u56e0\u4f5c\u76f8\u5e94\u8c03\u6574\u5373\u53ef\u30022\u3001\u4e00\u4e2a\u5cf0\u6216\u51e0\u4e2a\u5cf0\u662f\u8d1f\u5cf0\u3002
\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5\uff1a\u6d41\u52a8\u76f8\u5438\u6536\u672c\u5e95\u9ad8\uff1b\u8fdb\u6837\u8fc7\u7a0b\u4e2d\u8fdb\u5165\u7a7a\u6c14\uff1b\u6837\u54c1\u7ec4\u5206\u7684\u5438\u6536\u4f4e\u4e8e\u6d41\u52a8
\u76f8\u3002 3\u3001\u6240\u6709\u5cf0\u5747\u4e3a\u8d1f\u5cf0\u3002\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5\uff1a\u4fe1\u53f7\u7535\u7f06\u63a5\u53cd\u6216\u68c0\u6d4b\u5668\u8f93\u51fa\u6781\u6027\u8bbe\u7f6e\u98a0\u5012\uff1b\u5149
\u5b66\u88c5\u7f6e\u5c1a\u672a\u8fbe\u5230\u5e73\u8861\u3002
4\u3001\u6240\u6709\u5cf0\u5747\u4e3a\u5bbd\u5cf0\u3002\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5\uff1a\u7cfb\u7edf\u672a\u8fbe\u5230\u5e73\u8861\uff1b\u6eb6\u89e3\u6837\u54c1\u7684\u6eb6\u5242\u6781\u6027\u6bd4\u6d41\u52a8
\u76f8\u5dee\u5f88\u591a\uff1b\u8272\u8c31\u67f1\u5c3a\u5bf8\u53ca\u7c7b\u578b\u9009\u62e9\u4e0d\u6b63\u786e\uff1b\u8272\u8c31\u67f1\u6216\u4fdd\u62a4\u67f1\u88ab\u6c61\u67d3\u6216\u67f1\u6548\u964d\u4f4e\uff1b
\u6e29\u5ea6\u53d8\u5316\u9020\u6210\u7684\u5f71\u54cd\u3002
5\u3001\u6240\u51fa\u5cf0\u6bd4\u9884\u60f3\u7684\u5c0f\u3002\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5\uff1a\u6837\u54c1\u9ecf\u5ea6\u8fc7\u5927\uff1b\u8fdb\u6837\u54c1\u6545\u969c\u6216\u8fdb\u6837\u4f53\u79ef\u8bef\u5dee\uff1b
\u68c0\u6d4b\u5668\u8bbe\u7f6e\u4e0d\u6b63\u786e\uff0e\u5b9a\u91cf\u73af\u4f53\u79ef\u4e0d\u6b63\u786e\uff1b\u68c0\u6d4b\u6c60\u6c61\u67d3\uff1b\u68c0\u6d4b\u5668\u706f\u51fa\u73b0\u95ee\u9898\u3002
6\u3001\u51fa\u73b0\u53cc\u5cf0\u6216\u80a9\u5cf0\u3002\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5\uff1a\u8fdb\u6837\u91cf\u8fc7\u5927\uff1b\u6837\u54c1\u6d53\u5ea6\u8fc7\u9ad8\uff1b\u4fdd\u62a4\u67f1\u6216\u8272\u8c31\u67f1
\u67f1\u5934\u5835\u585e\uff1b\u4fdd\u62a4\u62c4\u6216\u8272\u8c31\u67f1\u6c61\u67d3\u6216\u5931\u6548\uff1b\u67f1\u584c\u9677\u6216\u5f62\u6210\u77ed\u901a\u9053\u3002
7\u3001\u524d\u4f38\u5cf0\u3002\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5\uff1a\u8fdb\u6837\u91cf\u6216\u6837\u54c1\u6d53\u5ea6\u9ad8\uff1b\u6eb6\u89e3\u6837\u54c1\u7684\u6eb6\u5242\u8f83\u6d41\u52a8\u76f8\u6781\u6027\u5f3a\uff1b
\u4fdd\u62a4\u67f1\u6216\u8272\u8c31\u67f1\u6c61\u67d3\u6216\u5931\u6548\u3002
8\u3001\u62d6\u5c3e\u5cf0\u3002\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5\uff1a\u67f1\u8d85\u8f7d\uff0c\u964d\u4f4e\u6837\u54c1\u91cf\uff1b\u589e\u52a0\u67f1\u76f4\u5f84\u91c7\u7528\u8f83\u9ad8\u5bb9\u91cf\u7684\u56fa\u5b9a
\u76f8\uff1b\u5cf0\u5e72\u6270\uff0c\u5bf9\u6837\u54c1\u8fdb\u884c\u6e05\u6d01\u8fc7\u6ee4\uff1b\u8c03\u6574\u6d41\u52a8\u76f8\uff1b\u7845\u7f9f\u57fa\u4f5c\u7528\uff0c\u52a0\u5165\u4e09\u4e59\u80fa\uff0c\u7528
\u78b1\u81f4\u949d\u5316\u67f1\u589e\u52a0\u7f13\u51b2\u6db2\u6216\u76d0\u7684\u6d53\u5ea6\u964d\u4f4e\u6d41\u52a8\u76f8 pH \u503c\uff1b\u67f1\u5185\u70e7\u7ed3\u4e0d\u9508\u94a2\u5931\u6548\uff0c\u66f4
\u6362\u70e7\u7ed3\u4e0d\u9508\u94a2\uff1b\u52a0\u5728\u7ebf\u8fc7\u6ee4\u5668\uff0c\u5bf9\u6837\u54c1\u8fdb\u884c\u8fc7\u6ee4\uff1b\u6b7b\u4f53\u79ef\u6216\u67f1\u5916\u4f53\u79ef\u8fc7\u5927\uff0c\u5c06\u8fde
\u63a5\u70b9\u964d\u81f3\u6700\u4f4e\uff1b\u5c3d\u53ef\u80fd\u4f7f\u7528\u5185\u5f84\u8f83\u7ec6\u7684\u8fde\u63a5\u7ba1\uff1b\u67f1\u6548\u4e0b\u964d\uff0c\u66f4\u6362\u67f1\u5b50\uff1b\u91c7\u7528\u4fdd\u62a4
\u67f1\uff0c\u5bf9\u67f1\u5b50\u8fdb\u884c\u518d\u751f\u3002
9\u3001\u51fa\u73b0\u5e73\u5934\u5cf0\u3002\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5\uff1a\u68c0\u6d4b\u5668\u8bbe\u7f6e\u4e0d\u6b63\u786e\uff1b\u8fdb\u6837\u4f53\u79ef\u592a\u5927\u6216\u6837\u54c1\u6d53\u5ea6\u592a\u9ad8\u3002
10\u3001\u51fa\u73b0\u9b3c\u5cf0\u3002\u89e3\u51b3\u65b9\u6cd5\uff1a\u8fdb\u6837\u9600\u6b8b\u4f59\u5cf0\uff0c\u5728\u6bcf\u6b21\u8fdb\u5b8c\u6837\u540e\u7528\u5145\u8db3\u7684\u65f6\u95f4\u6765\u5e73\u8861
\u548c\u6e05\u6d17\u7cfb\u7edf\uff1b\u6837\u54c1\u4e2d\u5b58\u5728\u672a\u77e5\u7269\uff0c\u6539\u8fdb\u6837\u54c1\u7684\u9884\u5904\u7406\uff1b\u6d41\u52a8\u76f8\u6c61\u67d3\uff0c\u66f4\u6362\u65b0\u6d41\u52a8
\u76f8\uff0c\u5c3d\u53ef\u80fd\u73b0\u914d\u73b0\u7528\uff0c\u9694\u591c\u7684\u6d41\u52a8\u76f8\u518d\u6b21\u4f7f\u7528\u65f6\u8981\u8fc7\u6ee4\uff1b\u5c3d\u53ef\u80fd\u4f7f\u7528 HPLC \u7ea7\u8bd5
\u5242\uff1b\u6d41\u8def\u4e2d\u6709\u5c0f\u7684\u6c14\u6ce1\uff0c\u6253\u5f00 Purge \u9600\uff0c\u52a0\u5927\u6d41\u901f\u6392\u9664\u3002
11\u3001 \u7ed3\u8bed\u3002\u4ee5\u4e0a\u5185\u5bb9\u53ea\u662f\u5bf9\u6db2\u76f8\u8272\u8c31\u4e2d\u51fa\u73b0\u7684\u5e38\u89c1\u7684\u95ee\u9898\u8fdb\u884c\u4e86\u5206\u6790\uff0c\u5728\u6545\u969c
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1、色谱柱“堵”的表现

“堵”的表现现象就是柱压异常升高,直接原因就是流路不畅。堵塞的主要位置就是在色谱柱的前端,最主要原因就是流动相里有杂质,杂质的主要来源就是细菌。

2、色谱柱“堵”的原因分析

原因1:配制流动相时细菌污染

首先我们要认识到,一般的国产甲醇其实不需要额外过滤处理,直接使用没有问题。即使是有些固态微粒杂质,也能在液相流路系统最前端的过滤头上排除,真正容易引起问题的,是水中的细菌。解决它的方法很简单,就是确保水的可靠性。这里有两种方式推荐:

(1)使用实验室专用纯水机,既方便又可靠,质量也放心。
(2) 成箱购买市售品牌纯净水,先随机抽取一支做一下细菌平板实验,待菌落数合格方可使用。

原因2:使用流动相时的细菌污染

流动相刚开始没有长菌,在使用时却产生了细菌污染。这主要是在使用多元液相色谱仪时的一种不良使用习惯造成的。举最简单的例子:50%的甲醇水流动相,有两种使用方式。一种方式是在上机前就配好混合在一起,另一种方式是在流路A放纯甲醇,流路B放纯水。

从单纯实验效果来说,后一种有明显的优点:首先是简单,不需要实验者另个计算配比混合,其次就是比例准确,能得到保留时间重复性极好的实验效果。

但是,它有一个致命的缺陷,就是纯水在流动相瓶中几天时间就会长细菌(很多情况下不仅仅用纯水作流动相,而是用缓冲盐溶液,本身就是优质肥料,细菌长得更迅速),一旦有细菌柱子就坏得很快。

所以,宁可牺牲小小的保留时间的重复性,也不要用纯水溶液作为流动相的一组。可用10%的甲醇水代替纯水溶液,这样可以有效排除长细菌的隐患,既可作流动相,也可冲柱。

原因3:不适当操作

常见问题有以下几种:

(1)在更换零件时选择的型号有误,接口不是很匹配,在拧紧的时候产生变形而使得管路堵塞。
(2)样品处理液净化得不干净,长期会在六通阀和柱之间形成阻塞不畅。
(3)在使用手动六通阀时,有些人可能由于手劲小的原因,转动的不到位,于是造成流路形成了死堵,压力快速升高超过警戒值。
(4)在使用金属管路作出废液管时,应当注意最好废液瓶中先放一些水,并把废液管的出口端放在液面下。如果位于在液相上且实验使用较高浓度的缓冲盐溶液,在停机时可能在出口端结晶成块并造成堵塞。这种情况不常见,但却的确发生过。

“堵”的原因讲了不少,现介绍查堵的方法。

3、查堵的方法及处理措施

在发生“堵”的现象后,就需要找出原因,主要是什么位置发生了“堵”。注意,绝大多数情况下,整个系统只会有一个地方发生堵塞。

查堵的方法是从尾向前逆向分段拆开,仔细观察压力数值,如果某一个部件(柱子除外)装上和拆下时的压力差别很大,可发展变化判断。至于柱的堵塞,可以通过换同样规格的柱的压力是否一致来判断。具体检测步骤:

(1)首先断开真空泵的入口处,此时PEEK管里充满液体,使PEEK管低于溶剂瓶,看液体是否自由滴下,如果液体不滴或缓慢滴下,则是溶剂过滤头堵塞。处理方法:用30%的硝酸浸泡半个小时,在用超纯水冲洗干净。如果液体自由滴下,溶剂过滤头正常,在检查;

(2)打开冲洗阀(purge阀),使流动相不经过柱子,如果压力没有明显下降,则是过滤白头堵塞。处理方法:将过滤白头取出,用10%的异丙醇超声半个小时。如果压力降至100PSI (6.7 Bar)以下,过滤白头正常,在检查;

(3)把色谱柱出口端取下,如果压力不下降,则是柱子堵塞。处理方法:如果是缓冲盐堵塞,则用95%的水冲至压力正常。如果是一些强保留的物质导致堵塞,则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。假如按上面的方法长时间冲洗压力都不下降,则可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上,用流动相冲洗柱子。这时,如果柱压仍不下降,只有换柱子入口筛板,但一旦操作不甚,很容易造成柱效下降,所以尽量少用。答案来自



最好不要反冲,有损寿命。一般的话,堵了的应该是柱内的过滤片堵塞,可以拿超声波超几分钟看看,不行的话应该是柱子堵塞,可以把色谱柱头上方挖掉一点填料,重新填补(慎用,也会损伤色谱柱) 最好使用时加上保护柱!

色谱柱堵塞的话会造成峰宽展。其实色谱柱被堵塞的最典型标志是柱压升高。

对于C8和C18色谱柱来说,进行反冲就可以了,高水相低有机相的混合溶液,小流速进行冲洗,冲洗的过程中不要接检测器。

对柱子保护不当

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