原生质体的固体培养法具体有哪些做法? 原生质体的固体培养法有哪些步骤?

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固体培养的具体做法是:将原生质体悬浮液进行计数后,离心收集;用液体培养基将密度调至植板密度的2倍。将与上述液体培养基成分相同但加入0.6%1%琼脂的培养基中加热,待融化后冷却至35摄氏度,置于35摄氏度恒温水浴中保温。

将这种培养基与上述悬浮培养液等体积混合均匀,迅速注入培养皿中(约1mm厚),并使之尽量平展。然后用封口膜封闭培养皿,将培养皿置于倒置显微镜下观察,在培养皿外的相应位置上标记各个单细胞,以便保证以后能分离出纯单细胞无性系。最后将培养皿置于适当的条件下,对细胞进行培养。



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