检测蛋白质表达的方法
答：4、观察颜色变化，如果产生紫色反应，则说明样品中含有蛋白质。二、紫外吸收法 1、准备待测样品和试剂，如蛋白质标准品、蛋白质稀释液等。2、将待测样品放入紫外分光光度计中，设置波长为280nm。3、记录吸光度值，根据标准曲线计算出蛋白质浓度。蛋白质检测在生物科学研究中的应用 一、蛋白质表达水平检...
答：免疫印迹法（WB，Western blotting）：是常用的蛋白质检测方法，通过特异性抗体与目标蛋白质结合来检测目标蛋白质的表达水平。免疫组化法（IHC）：是一种在组织学样本中检测蛋白质表达的方法，利用特异性抗体结合目标蛋白质，再通过染色或荧光信号来检测目标蛋白质的表达水平。酶联免疫吸附实验（ELISA）：是...
答：- 清洗膜，去除未结合的二抗。- 用底物显色或进行放射自显影，检测目的蛋白。5. WB常见问题及解决方法：- 信号弱：检查蛋白表达量、样本处理、转膜效率等。- 非特异性条带：优化抗体使用、减少样品蛋白量、控制蛋白质降解等。- 背景高：确保有效封锁、适当清洗膜、控制抗体浓度等。- 条带弥散：调整...
答：蛋白表达水平的检测方法有多种，常用的几种包括：免疫印迹法（WB）：通过将蛋白质样品进行电泳分离，然后将其转移到膜上，并利用特异性抗体与目标蛋白结合形成复合物，最后使用化学发光或染色方法检测复合物的存在和相对丰度。酶联免疫吸附实验（ELISA）：通过将目标蛋白固定在微孔板上，然后使用特异性抗体与...
答：2、双缩脲法 双缩脲法是一个用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液，呈蓝色，由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时（多肽），试液中的铜与多肽配位，配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5...
答：【答案】：C DNA印迹技术（Southern blotting）用于DNA的检测；RNA印迹技术（Northernblotting）用于RNA的检测；蛋白质印迹技术（Western blotting）用于蛋白质的检测，可分析蛋白质表达量；PCR常用于体外目的DNA的扩增。
答：首先，样品蛋白质会通过电泳的方式在凝胶上进行分离，然后将凝胶转移到亲水性的膜上，接着用抗体探针针对特定的蛋白质进行化学反应，最后通过特定的检测方法来得出目标蛋白的信息。免疫印迹法广泛应用于蛋白质的检测，包括检测免疫相应性，检测蛋白质表达水平，以及检测蛋白质修饰和结构等。在生物医学研究中，...
答：免疫组化是一种检测和分析特定蛋白质表达情况的方法，主要应用于病理学领域。以下是详细的解释：1. 免疫组化的基本概念 免疫组化，全称为免疫组织化学技术，是一种结合了免疫学原理和组织化学技术的检测方法。其主要应用于病理学研究中，用于检测细胞或组织中的特定蛋白质。通过标记特异性抗体，能够识别并...
答：在进行免疫组化检查时，首先需要对目标组织进行切片，然后将其置于特定的实验条件下。接着，利用特异性抗体与组织中表达的蛋白质结合，形成可检测的复合物。再通过显微镜或其他检测设备观察这些复合物的分布和数量，从而推断出细胞中蛋白质的表达情况和细胞的特性。这种检测方法广泛应用于肿瘤的诊断、鉴别诊断...
答：检测蛋白质的方法如下：1、凯氏定氮法：准备4个50mL凯氏烧瓶并标号，向1、2号烧瓶中加入定量的蛋白质样品，另外两个烧瓶作为对照，在每个烧瓶中加入硫酸钾-硫酸铜混合物。再加入浓硫酸，将4个烧瓶放到消化架上进行消化，之后进行蒸馏。全部蒸馏完毕后用标准盐酸滴定各烧瓶中收集的氨量，直至指示剂混合...
网友评论：
晋鸿17250465747：
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量 -
54859元泻
： 实时荧光定量PCR检测mRNA的表达,然后westernblot检测蛋白表达量. 首先你确定拿到了这两种细胞系,通过PCR反应证明一个是野生型一个是突变型,即snp.然后用试剂盒提取RNA,设计引物,采用半定量或绝对定量的方法,测定mRNA表达水平;然后另取细胞裂解,提取总蛋白,用特异性抗体检测蛋白表达量.
晋鸿17250465747：
检测蛋白质表达除了Western blot,还有什么方法? -
54859元泻
： 你能否说的详细一点呢?你想要怎么做?至少说,你想看的蛋白是体内的,还是外源转染进去的质粒表达的?如果是体内的,western是比较好的方法;如果是分泌蛋白,则可以用ELISA;如果是外源转染进去的,则可以融合一个GFP什么的进去,看荧光就行了.还是得看你想怎么做,还有你的蛋白是什么状态的.上面有人说RT-PCR,检测mRNA是一种间接的途径.如果此蛋白有转录后调控的机制,则mRNA的量不能反应蛋白的量.
晋鸿17250465747：
用什么方法探知细胞内蛋白质表达水平 -
54859元泻
： Western blot ———— Western Blot中文一般称为蛋白质印迹.它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法.其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色.通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息. 请参考:http://baike.baidu.com/view/555578.htm
晋鸿17250465747：
检验蛋白质的方法 -
54859元泻
： 用蜡烛点燃,可以闻到有特殊的焦丑味,就说明有蛋白质的成分.
晋鸿17250465747：
目前常用的检测基因mRNA蛋白表达的方法有哪些?
54859元泻
： 检测基因蛋白表达的方法有:免疫印迹法.免疫组织化学法.ELISA法.流式细胞术检测法.这在实际的操作过程中要注意使用.
晋鸿17250465747：
哪些实验方法可检测细胞中某种蛋白表达量 -
54859元泻
： 制备抗体,做western blot或者免疫染色
晋鸿17250465747：
怎样用抗原 - 抗体的方法检验目的基因是否翻译出蛋白质?原理是什么? -
54859元泻
： 检测目的基因是否进入到受体细胞的方法,一般包括分子水平检测和个体水平检测.其中分子检测有3个层次:1目的基因是否整合到受体细胞染色体dna上,2目的基因是否转录出mrna,3目的基因是否翻译出蛋白质.1和2都可以用dna分子杂交...
晋鸿17250465747：
基因工程表达出的蛋白质怎么鉴定 -
54859元泻
： 这个叫做“原核表达”.首先你要有原核表达用载体,然后你要有该蛋白对应的cDNA序列,以此构建原核表达融合载体,最后将构建好的载体转入如BL21类的大肠杆菌菌株内,通过IPTG的方法诱导表达就可以了.
晋鸿17250465747：
蛋白质的检验方法 -
54859元泻
： 蛋白质测定方法: 测定蛋白质的方法可分为两大类: 一类是利用蛋白质的共性,即含氮量 、肽键和折射率测定蛋白质含量 ; 另一类是利用蛋白质中特定氨基酸残基、酸性和碱性基团 以及芳香基团等测定蛋白质含量. (1) 凯氏定氮法: 是通过测出样品中的总含氮量再乘以相应的蛋白质系数而求出蛋白质的含量,由于样品中含有少量非蛋白质含氮化合物,故此法的结果称为粗蛋白质含量.(是食品上蛋白质含量测定最常用的方法) (2) 双缩脲法 (3) 染料结合法 (4) 酚试剂法:方法简便快速,故多用于生产单位质量控制分析. (5) 紫外分光光度法-近红外光谱法
晋鸿17250465747：
蛋白质组的鉴定方法 -
54859元泻
： 如蛋白质鉴定结果、蛋白质的亚细胞定位、蛋白质在不同条件下的表达水平等信息.目前应用最普遍的数据库是NRDB和dbEST 数据库.NRDB由SWISS2PROT 和GENPETP 等几个数据库组成,dbEST是由美国国家生物技术信息中心(NCBI)和欧洲生物信息学研究所(EBI)共同编辑的核酸数据库;计算机分析软件主要有蛋白质双向电泳图谱分析软件、蛋白质鉴定软件、蛋白质结构和功能预测软件等.
