酵母双杂结果图
答：阴性对照：pGADT7-T + pGBKT7-lam，其中已经明确T蛋白和lam蛋白在酵母细胞内不能发生结合。 系统显色对照，pGADT7-Pcl1，该表达质粒转入酵母细胞就能引起-半乳糖苷酶和-半乳糖苷酶的分泌，从而检测显色系统是否有问题。（2）假阳性现象 多种原因可能造成假阳性结果，常见的有...
答：1. 实验目的与背景 本次实验旨在构建龙须菜高温胁迫下的cDNA文库，并使用CaM作为诱饵质粒构建表达载体pGBKT-CaM。通过SMART技术将重组质粒转化到酵母菌Y187中，以研究蛋白质之间的相互作用。2. 酵母双杂交系统原理 酵母双杂交系统基于酵母转录激活因子GAL4的结构特性。GAL4包含DNA结合域（BD）和转录激活域...
答：酵母双杂交系统由 Fields和Song等首先在研究真核基因转录调控中建立 i .典型的真核生长转录因子, 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域: DNA结合结构域(DNA-binding domain)和转录激活结构域(transcription-activating domain).前者可识别DNA上的特异序列, 并使转录激活结构域定位于所调节的基因的...
答：在逆双杂交系统中，Vidal团队在URA3基因的启动子区域引入了Gal4结合位点，使得酵母菌株在特定条件下才能存活。在缺乏尿嘧啶的选择性培养基上，只有当“诱饵”和“猎物”蛋白结合并激活URA3基因时，酵母菌才能生长。而在含有5-FOA的完全培养基上，这种结合会抑制细胞生长。如果目的蛋白，如融合了DB或AD的...
答：酵母双杂交系统 真核生物转录调控因子具有组件式结构 (modular) 特征，这些蛋白往往由两个或两个以上相互独立的结构域， 其中DNA结合结构域( binding domain， BD)和转录激活结构域( activation domain， AD)是转录激活因子发挥功能所必须的。BD能与特定基因启动区结合，但不能激活基因转录，由.不同转录...
答：同时，该系统还被用于筛选与各种转录激活因子的相互作用，如单纯性疱疹病毒（HSV-1）调控蛋白VP16 [60]，c-Myc及雄性激素受体。SOS和RAS募集系统 (SRS and RRS)是Ras信号通路转录的旁路（are bypassing the transcriptional readout by using the Ras signalling pathway），在酵母细胞和哺乳动物中是相似...
答：酵母双杂二缺板子要在平板划线拍照的。划线的质量好坏，严重的影响了结果的美观，同时也使结果的可靠性受到质疑。划线使用的酵母菌液需要测量OD值，OD600值在0.5时划线最合适。
答：100字有点困难，但是还是可以试试，如果有疑问可以追问。酵母双杂交是一种用于检测两种蛋白是否互作的一种手段。实验中将A蛋白与转录激活因子连接，B蛋白与另一个转录因子（比如RNA聚合酶的alpha亚基）融合。如果A能够和B发生互作，那么转录激活因子就可以激活报告基因的转录，从而使菌株产生某些特性（抗性或...
答：这些结果表明，三杂交系统可用于发现小配体的受体并筛选已知受体的新配体。原文链接 A three-hybrid system for detecting small ligand–protein receptor interactions 这篇文章发得比较早，于1996年发表于PNAS杂志上，只要经典，再早的文献都有参考价值。最近有个蛋白复合物需要做酵母双杂验证其作用，但...
答：在酵母双杂实验中，蛋白最常见的变化时间为12至24小时，有的变化时间较长，可能需要24至48小时或更长时间。因此，在出现长菌不变蓝的情况时，可以尝试等待更长的时间，或者根据实验条件进行调整，例如改变培养时间、温度、养分等条件，以确保实验结果的准确性。
网友评论：
澹冰18391855166：
请问下图的酵母双杂交中对比左图和右图是说明什么问题 -
64303黄琬
： 酵母双杂交系统应用中常遇到的问题一是假阳性较多,二是转化效率偏低.所谓假阳性就是:在待研究的两个蛋白间没有发生相互作用的情况下,报告基因被激活.主要原因是由于BD融合诱饵蛋白有单独激活作用,或者这种融合蛋白的激活作...
澹冰18391855166：
酵母双杂交系统的介绍 -
64303黄琬
： 酵母双杂交系统是将待研究的两种蛋白质的基因分别克隆到酵母表达质粒的转录激活因子(如GAL4等)的DNA结合结构域基因和转录激活因子(如GAL4等)激活结构域基因,构建成融合表达载体,从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统.
澹冰18391855166：
酵母双杂交的具体过程是什么?(中文)
64303黄琬
： 菌株与质粒AH109酵母菌株(MATa,trp1. 901,leu2—3,112,ura3-52,his3-200,gal4A,gal8O~X, LYS2::G地1U^s-GALlT^T^-HIS3, G U^s—GAI2T^T^- ADE2,URA3::h吐1U^s.h吐1T^T^.1acZ),YM187酵母 菌株(NATQ,um3-52,his3-200,ade2—101,trpl-...
澹冰18391855166：
酵母双杂交 - 酵母双杂交两种菌杂交效率不高有哪些原因?
64303黄琬
： 酵母双杂交技术研究进展 张迪 霍克克 顾科隆 赵翔 李育阳 提 要 酵母双杂交技术是一种有效的真核活细胞内研究方法,在蛋白质相互作用的研究方面得到了广泛的应用并取...
澹冰18391855166：
酵母双杂交的局限性 -
64303黄琬
： 酵母双杂交系统是分析蛋白-蛋白间相互作用的有效和快速的方法, 有多方面的应用, 但仍存在一些局限性.⑴双杂交系统分析蛋白间的相互作用定位于细胞核内, 而许多蛋白间的相互作用依赖于翻译后加工如糖基化、二硫键形成等, 这些反...
澹冰18391855166：
酵母双杂交的特点 -
64303黄琬
： 酵母双杂交系统的最主要的应用是快速、直接分析已知蛋白之间的相互作用,及分离新的与已知蛋白作用的配体及其编码基因.除上述的同仁回答外,还有其他的一些问题:假阳性较多,假阴性现象,转化效率也是关键点之一.
澹冰18391855166：
酵母菌双杂交到底是什么? 请解释一下 -
64303黄琬
： 100字有点困难,但是还是可以试试,如果有疑问可以追问.酵母双杂交是一种用于检测两种蛋白是否互作的一种手段.实验中将A蛋白与转录激活因子连接,B蛋白与另一个转录因子(比如RNA聚合酶的alpha亚基)融合.如果A能够和B发生互作,那么转录激活因子就可以激活报告基因的转录,从而使菌株产生某些特性(抗性或能够在基本培养基上生长),反之则不能.参考资料:http://baike.baidu.com/link?url=gzze1wAVvxbMwPcV8xUjouZsKo1gCjEVnSCm7QeV0m-3CW_1od9IqgWbY25byn91OzKfM5kGeMRah5KdaccKta
澹冰18391855166：
酵母双杂交系统原理的应用 -
64303黄琬
： 酵母双杂交系统能在体内测定蛋白质的结合作用,具有高度敏感性. 主要是由于: ①采用高拷贝和强启动子的表达载体使杂合蛋白过量表达. ②信号测定是在自然平衡浓度条件下进行, 而如免疫共沉淀等物理方法为达到此条件需进行多次洗涤,降低了信号强度. ③杂交蛋白间稳定度可被激活结构域和结合结构域结合形成转录起始复合物而增强,后者又与启动子DNA结合, 此三元复合体使其中各组分的结合趋于稳定. ④通过mRNA产生多种稳定的酶使信号放大. 同时, 酵母表型, X-Gal及HIS3蛋白表达等检测方法均很敏感.
澹冰18391855166：
酵母双杂
64303黄琬
： 最后不要去掉, 不过如果你去了也应该没事. AD,BD是在你接的基因前面的,好像还分别有C-MYC和HA的肽段.
澹冰18391855166：
酵母双杂 te buffer是什么意思 -
64303黄琬
： 你好 酵母双杂交系统由Fields和Song等首先在研究真核基因转录调控中建立 .典型的真核生物转录因子, 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域: DNA结合结构域(DNA-binding domain)和转录激活结构域(transcription-activating domain).前者可识别DNA上的特异序列, 并使转录激活结构域定位于所调节的基因的上游, 转录激活结构域可同转录复合体的其他成分作用, 启动它所调节的基因的转录. 希望对你有帮助
