rna+scope+原位杂交
答:1. 提高实验可靠性及准确性:2. 通过加热促进RNA解离:3. 增强探针与RNA的杂交效率:4. 提高杂交灵敏度:5. 破坏RNA二级结构:6. 释放RNA分子:7. 打开RNA结构利于探针杂交:8. 减少假阳性结果:9. 消除内源性核酸酶影响。
答:主要是通过加热使细胞组织中的RNA解离出来,以增强探针与RNA之间的杂交效率和灵敏度。具体来说,热修复可以破坏RNA分子之间的二级结构(如RNA序列中的内部稳定性结构),同时也可以帮助将RNA从组织或细胞中释放出来,并打开RNA分子上的结构以方便探针的杂交。此外,热修复还有助于消除组织中内源性核酸酶的...
答:原位杂交,即in situ hybridization,是一种生物学技术,它通过将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行结合,来确定特定基因或RNA在特定位置的表达情况。这项技术的关键是利用DNA或RNA探针,它们能够与细胞内的互补链进行碱基配对,形成可见的杂交体。其中,RNA原位核酸杂交,或称RNA原位杂交组织化学,是...
答:RNA原位杂交不同于DNA原位杂交主要有:(1)检测目的不同:RNA原位杂交检测和分析的主要为内源性基因,包括细胞内固有基因、异常基因和变异基因。以正确反映组织与细胞之间相互关系及功能、代谢状态、探索疾病发病机理、观察治疗疗效和评估疾病预后等。其次为对外源性基因检测,以获得病毒和细菌类型等病原学诊...
答:原位杂交:在研究DNA分子复制原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,能过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 双键分子的特点,应带有标记的(有放射性同位素,如3H、35S、32P、荧光素生物素、地高辛等非放射性物质)DAN或 RNA片段作为核酸探针,与...
答:原位杂交(In Situ Hybridization):原位杂交可以检测RNA在细胞或组织中的位置和分布情况。通过利用与目标RNA互补的探针,可以使探针与目标RNA发生特异性结合,并通过特定的探测方法(如荧光或酶标记)来可视化目标RNA的位置。逆转录聚合酶链式反应(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,RT-PCR):...
答:1.浸入乙酸酐和三乙醇胺中以减低静电效应,减少探针对组织的非特异性背景染色。2.将组织切片浸入预杂交液中可达到封闭非特异性杂交点的目的,从而减低背景染色。预杂交液和杂交液的区别在于前者不含探针和dextran sulphate。3.杂交的温度和时间杂交的温度也是杂交成功与否的一个重要环节,大约在30~60℃之间...
答:经放射自显影或显色反应检测特异结合的探针.经典的核算杂交方法主要包括:DNA印迹杂交(Southernblot)RNA印迹杂交(Northernblot)以及斑点杂交和原位杂交:1、DNA印迹杂交(DNAblothybridization)——有两种核酸印迹法:将DNA或RNA溶液直接点样于硝酸纤维素膜或尼龙膜上(斑点或狭线印迹)经琼脂糖凝胶电泳将...
答:原位杂交探针长度是100-400nt。用于原位杂交的探针可以是单链或双链DNA,也可以是RNA探针。通常探针操作的长度以100-400nt为宜,过长则杂交率减低。最近研究结果表明,寡核苷酸探针(16-30nt)能自由出入细菌和组织细胞壁,杂交效率明显高于长探针,因此,寡核苷酸探针和不对称PCR标记的小DNA探针或体外...
答:原位杂交(In Situ Hybridization)也叫原位杂交组化(in situ hybridization histochemistry, ISHH),是一种固相分子杂交的方法,它是用标记的DNA或RNA为探针,在原位检测组织或细胞内特定核酸序列的方法。探针的种类按所带标记物可分为同位素标记探针和非同位素标记探针两大类。常用的同位素标记物有3H、35S、...
网友评论:
晏翁13040607411:
原位杂交的基本定义 -
11102宣法
: 原位杂交(in situ hybridization)将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交,称为原位杂交. 使用DNA或者RNA探针来检测与其互补的另一条链在细菌或其他真核细胞中的位置. RNA原位核酸杂交又称RNA原位杂交组织化学或RNA原位...
晏翁13040607411:
原位杂交的应用 -
11102宣法
: ①细胞特异性mRNA转录的定位,可用于基因图谱,基因表达和基因组进化的研究;②感染组织中病毒DNA/RNA的检测和定位,如EB病毒mRNA、人类乳头状瘤病毒和巨细胞病毒DNA的检测;③癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测;④基因在染色体上的定位;⑤检测染色体的变化,如染色体数量异常和染色体易位等;⑥分裂间期细胞遗传学的研究,如遗传病的产前诊断和某些遗传病基因携带者的确定,某些肿瘤的诊断和生物学剂量测定等.
晏翁13040607411:
RNA荧光原位杂交 -
11102宣法
: 原位杂交:在研究DNA分子复制原理的基础上发展起来的一种技术.其基本原理是两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,能过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 双键分子的特点,应带有标记的(有放射性同位素,如3H、35S...
晏翁13040607411:
在原位杂交中 为什么rna可以和dna杂交?求解释 -
11102宣法
: 因为碱基互补配对啊.RNA不光和DNA杂交,还可以和RNA杂交. RNA原位核酸杂交又称RNA原位杂交组织化学或RNA原位杂交.该技术是指运用cRNA或寡核苷酸等探针检测细胞和组织内RNA表达的一种原位杂交技术.其基本原理是:在细...
晏翁13040607411:
请教关于microRNA原位杂交 -
11102宣法
: RNA原位核酸杂交(RNA nucleic acid hybridization in situ)又称RNA原位杂交组织化学(RNA in situ hybridization histochemistry)或RNA原位杂交(RNA in situ hybridization RISH).该技术是指运用cRNA或寡核苷酸等探针检测细胞和组织内...
晏翁13040607411:
请教原位杂交 -
11102宣法
: 原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程.原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行.另有荧光原位杂交.中文名:原位杂交 外文名:in situ ...
晏翁13040607411:
rna whole mount in situ hybridization是什么实验 -
11102宣法
: 原位杂交中RNA的总量,是指用于原位杂交的材料中RNA的量.
晏翁13040607411:
分子杂交有什么分法?
11102宣法
: 分子杂交包括有Southern杂交、斑点杂交及原位杂交. (1) Southern杂交:1975年,Suthern建立了吸印杂交技术,为DNA分析奠定了基础.这是一种将经限制酶切的DNA片段,琼脂糖凝胶电泳分离后,转移至固相支持物(硝酸纤维素膜或尼龙...
晏翁13040607411:
分子杂交有什么分法? -
11102宣法
: 分子杂交(molecularhybridization)确定单链核酸碱基序列的技术.其基本原理是待测单链核酸与已知序列的单链核酸(叫做探针)间通过碱基配对形成可检出的双螺旋片段.这种技术可在DNA与DNA,RNA与RNA,或DNA与RNA之间进行,形...
晏翁13040607411:
核酸分子杂交的主要实验方法有哪些?主要用途是什么 -
11102宣法
: 1.分类:根据杂交对象的不同可分为:DNA与DNA;RNA与DNA.另外,根据杂交对象位置的不同可分为:固相杂交,液相杂交,原位杂交. 2.用途:可通过特定序列的探针检测样品中是否含有与之同源的核酸序列.基因克隆的筛选,酶切图谱制作,基因组中特定基因序列的定量和定性检测,基因突变分析,疾病的诊断、微生物病原体检测.