酵母双杂交技术定义
答:酵母双杂交系统是在真核模式生物酵母中进行的,研究活细胞内蛋白质相互作用,对蛋白质之间微弱的、瞬间的作用也能够通过报告基因的表达产物敏感地检测得到,它是一种具有很高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术。原理:酵母双杂交系统的建立是基于对真核生物调控转录起始过程的认识。细胞起始基因转录需要有反式...
答:酵母双杂交技术是一种在分子生物学研究中常用的技术,主要用于研究蛋白质之间的相互作用。这种技术的原理是基于真核生物的转录因子TFIID的结构,其中TFIID由TD和TBP两个亚基组成,它们之间通过一个名为helix-loop-helix的结构相互连接,形成稳定的复合物。在酵母双杂交系统中,TD和TBP被分别替换为两个目标蛋...
答:酵母双杂交技术(YeastTwo-Hybrid)是一种用来研究蛋白质相互作用的实验技术。该技术利用酵母细胞的自身特性,使得两个蛋白质分别与介导转录激活的Gal4转录因子不同区域结合,从而激发酵母细胞内特定的报告基因(reportergene)的表达。当两个蛋白质的结合能够激活报告基因的表达,则表明这两个蛋白质之间存在相...
答:酵母双杂交是一种探究蛋白质相互作用的新方法。它利用酵母细胞内的转录因子结构域和DNA结合域,将两个蛋白质的结构域分别与两个不同的酵母细胞中的转录因子结合,从而使两个蛋白质相互作用,并被检测出来。酵母双杂交的操作步骤 酵母双杂交的操作步骤如下:1.构建酵母双杂交载体 首先需要构建酵母双杂交载...
答:酵母双杂交是一种用于检测两种蛋白是否互作的一种手段。实验中将A蛋白与转录激活因子连接,B蛋白与另一个转录因子(比如RNA聚合酶的alpha亚基)融合。如果A能够和B发生互作,那么转录激活因子就可以激活报告基因的转录,从而使菌株产生某些特性(抗性或能够在基本培养基上生长),反之则不能。参考资料:http...
答:domain)。酵母双杂交系统(yeast two-hybrid system)是在酵母体内分析蛋白质-蛋白质相互作用的基因系统,也是一个基于转录因子模块结构的遗传学方法。该方法建立以来,经过不断的完善和发展,不但可以检测已知蛋白质之间的相互作用,更重要的在于发现新的与已知蛋白相互作用的未知蛋白....
答:酵母双杂是验证蛋白与蛋白之间的互作,酵母单杂是验证蛋白与DNA之间的互作。
答:酵母双杂交系统是将待研究的两种蛋白质的基因分别克隆到酵母表达质粒的转录激活因子(如GAL4等)的DNA结合结构域基因和转录激活因子(如GAL4等)激活结构域基因,构建成融合表达载体,从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统。
答:酵母双杂交法的原理:典型的真核生物转录因子, 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域: DNA结合结构域(DNA-binding domain)和转录激活结构域(transcription-activating domain)。前者可识别DNA上的特异序列, 并使转录激活结构域定位于所调节的基因的上游, 转录激活结构域可同转录复合体的其他成分...
答:1. 酵母双杂交系统的建立基于对真核生物调控转录起始过程的理解。2. 该系统利用反式转录激活因子,例如酵母中的GAL4,其结构模块化,通常由具有独立功能的结构域组成,包括DNA结合域(DNA-BD)和转录激活域(DNA-AD)。3. GAL4的DNA-BD和DNA-AD在物理上分离时各自保持功能,但只有当这两个结构域在...
网友评论:
咎帘19563855910:
酵母菌双杂交到底是什么? 请解释一下 -
2324五许
: 100字有点困难,但是还是可以试试,如果有疑问可以追问.酵母双杂交是一种用于检测两种蛋白是否互作的一种手段.实验中将A蛋白与转录激活因子连接,B蛋白与另一个转录因子(比如RNA聚合酶的alpha亚基)融合.如果A能够和B发生互作,那么转录激活因子就可以激活报告基因的转录,从而使菌株产生某些特性(抗性或能够在基本培养基上生长),反之则不能.参考资料:http://baike.baidu.com/link?url=gzze1wAVvxbMwPcV8xUjouZsKo1gCjEVnSCm7QeV0m-3CW_1od9IqgWbY25byn91OzKfM5kGeMRah5KdaccKta
咎帘19563855910:
酵母双杂交系统的介绍 -
2324五许
: 酵母双杂交系统是将待研究的两种蛋白质的基因分别克隆到酵母表达质粒的转录激活因子(如GAL4等)的DNA结合结构域基因和转录激活因子(如GAL4等)激活结构域基因,构建成融合表达载体,从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统.
咎帘19563855910:
酵母双杂交系统到底是啥回事?有啥用 -
2324五许
: 酵母双杂交系统由Fields和Song等首先在研究真核基因转录调控中建立 i .典型的真核生长转录因子, 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域: DNA结合结构域(DNA-binding domain)和转录激活结构域(transcription-activating ...
咎帘19563855910:
酵母单双杂交? -
2324五许
: 酵母双杂交系统是在真核模式生物酵母中进行的,研究活细胞内蛋白质相互作用,对蛋白质之间微弱的、瞬间的作用也能够通过报告基因的表达产物敏感地检测得到,它是一种具有很高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术.大量的研究文献表明...
咎帘19563855910:
谁能解释一下酵母双杂交系统的基本原理和操作流程 -
2324五许
: 酵母双杂交系统(yeast two-hybrid system)是在酵母体内分析蛋白质-蛋白质相互作用的基因系统,也是一个基于转录因子模块结构的遗传学方法.该方法建立以来,经过不断的完善和发展,不但可以检测已知蛋白质之间的相互作用,更重要的在于发现新的与已知蛋白相互作用的未知蛋白.
咎帘19563855910:
酵母双杂交系统原理的应用 -
2324五许
: 酵母双杂交系统能在体内测定蛋白质的结合作用,具有高度敏感性. 主要是由于: ①采用高拷贝和强启动子的表达载体使杂合蛋白过量表达. ②信号测定是在自然平衡浓度条件下进行, 而如免疫共沉淀等物理方法为达到此条件需进行多次洗涤,降低了信号强度. ③杂交蛋白间稳定度可被激活结构域和结合结构域结合形成转录起始复合物而增强,后者又与启动子DNA结合, 此三元复合体使其中各组分的结合趋于稳定. ④通过mRNA产生多种稳定的酶使信号放大. 同时, 酵母表型, X-Gal及HIS3蛋白表达等检测方法均很敏感.
咎帘19563855910:
论述酵母双杂交技术的原理和应用情况 -
2324五许
:[答案] 酵母双杂交技术研究进展张迪 霍克克 顾科隆 赵翔 李育阳提 要 酵母双杂交技术是一种有效的真核活细胞内研究方法,在蛋白质相互作用的研究方面得到了广泛的应用并取得了许多有价值的重要发现.作为一个完整的实验系统,...
咎帘19563855910:
酵母双杂交的特点 -
2324五许
: 酵母双杂交系统的最主要的应用是快速、直接分析已知蛋白之间的相互作用,及分离新的与已知蛋白作用的配体及其编码基因.除上述的同仁回答外,还有其他的一些问题:假阳性较多,假阴性现象,转化效率也是关键点之一.
咎帘19563855910:
酵母双杂交 - 酵母双杂交两种菌杂交效率不高有哪些原因?
2324五许
: 酵母双杂交技术研究进展 张迪 霍克克 顾科隆 赵翔 李育阳 提 要 酵母双杂交技术是一种有效的真核活细胞内研究方法,在蛋白质相互作用的研究方面得到了广泛的应用并取...
咎帘19563855910:
想知道酵母双杂交到底咋回事啊,看了半天书,晕,也看不明白,希望能用简单明了的通俗话帮我解释一下 -
2324五许
: 听过破镜重圆的故事吧.假如甲乙两个人各拿半块镜子,只有当他们两人在一起的时候这个镜子才可以拼成一个整个的.酵母双杂交我没做过,我的理解就是这样的:你看到的BD和AD分别是两个半块的镜子,你想研究的两个蛋白则是甲乙两个拿镜子的人. 如果你的两个蛋白能相互作用,它们手上的镜子就能拼在一起,也就是BD和AD可以结合, 它们结合以后,就形成了一个完整的镜子:呈现完整的GAL4转录因子活性并可激活UAS下游启动子,使启动子下游基因LacZ得到转录而报告出来...