酵母双杂交的目的
答：1、研究蛋白质之间的相互作用：酵母双杂交技术可以用于研究蛋白质之间的相互作用，这对于理解蛋白质的功能和生物学过程具有重要意义。2、发现新的蛋白质相互作用：通过酵母双杂交技术，研究人员可以发现新的蛋白质相互作用，这有助于揭示新的生物学机制和疾病病理。3、筛选蛋白质相互作用抑制剂：酵母双杂交技...
答：酵母双杂交是一种探究蛋白质相互作用的新方法。它利用酵母细胞内的转录因子结构域和DNA结合域，将两个蛋白质的结构域分别与两个不同的酵母细胞中的转录因子结合，从而使两个蛋白质相互作用，并被检测出来。酵母双杂交的操作步骤 酵母双杂交的操作步骤如下：1.构建酵母双杂交载体 首先需要构建酵母双杂交载...
答：酵母双杂交技术（YeastTwo-Hybrid）是一种用来研究蛋白质相互作用的实验技术。该技术利用酵母细胞的自身特性，使得两个蛋白质分别与介导转录激活的Gal4转录因子不同区域结合，从而激发酵母细胞内特定的报告基因（reportergene）的表达。当两个蛋白质的结合能够激活报告基因的表达，则表明这两个蛋白质之间存在相...
答：酵母双杂交系统是在真核模式生物酵母中进行的，研究活细胞内蛋白质相互作用，对蛋白质之间微弱的、瞬间的作用也能够通过报告基因的表达产物敏感地检测得到，它是一种具有很高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术。原理：酵母双杂交系统的建立是基于对真核生物调控转录起始过程的认识。细胞起始基因转录需要有反式...
答：因此，酵母单杂交系统主要用于发现转录因子与DNA结合的相互作用。双杂交系统Y2H（Yeast Two Hybrid System）是用于发现蛋白质相互作用的技术。利用了生物体细胞内天然存在的转录激活因子与其相应的DNA结合区域之间的非共价作用来实现识别蛋白质相互作用的目的。该系统通过将感兴趣的蛋白质分别与DNA绑定域（DNA-...
答：酵母双杂交系统是一种用于研究蛋白质间相互作用的技术，其操作步骤如下：首先，为了构建诱饵，将待研究的基因与Gal4、LexA或其他合适的蛋白的DNA结合域融合，然后将这一融合片段整合到诱饵质粒中，形成实验所需的分子探针。接着，将这个诱饵质粒导入到一种特定的酵母细胞株中，这种细胞已经被设计为缺乏表达...
答：酵母双杂交系统利用杂交基因通过激活报道基因的表达探测蛋白－蛋白的相互作用。主要有二类载体: a 含DNA -binding domain的载体; b 含DNA-activating domain的载体。上述二类载体在构建融合基因时， 测试蛋白基因与结构域基因必须在阅读框内融合。融合基因在报告株中表达， 其表达产物只有定位于核内才能驱动...
答：1. 实验目的与背景 本次实验旨在构建龙须菜高温胁迫下的cDNA文库，并使用CaM作为诱饵质粒构建表达载体pGBKT-CaM。通过SMART技术将重组质粒转化到酵母菌Y187中，以研究蛋白质之间的相互作用。2. 酵母双杂交系统原理 酵母双杂交系统基于酵母转录激活因子GAL4的结构特性。GAL4包含DNA结合域（BD）和转录激活域...
答：⑵酵母双杂交系统的一个重要的问题是假阳性。由于某些蛋白本身具有激活转录功能或在酵母中表达时发挥转录激活作用，使DNA结合结构域杂交蛋白在无特异激活结构域的情况下可激活转录。另外某些蛋白表面含有对多种蛋白质的低亲和力区域，能与其他蛋白形成稳定的复合物，从而引起报告基因的表达，产生假阳性结果。
答：酵母双杂交系统可以发现蛋白相互作用的蛋白的编码基因。这种方法的用途有：验证已知基因间的相互作用；可以快速发现编码蛋白与蛋白间相互作用的特定区域；通过扫描文库与活化区域的作用可以发现相互作用的蛋白，只需一个质粒就可以直接得到编码蛋白的基因，无需制备抗体和纯化蛋白，操作相对简便、快速，不许经过...
网友评论：
喻爽18049488450：
酵母双杂交(表达产物分析作用的系统) - 百科
36362邹磊
： 酵母双杂交系统由Fields和Song等首先在研究真核基因转录调控中建立 i .典型的真核生长转录因子, 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域: DNA结合结构域(DNA-binding domain)和转录激活结构域(transcription-activating ...
喻爽18049488450：
酵母双杂交的特点 -
36362邹磊
： 酵母双杂交系统的最主要的应用是快速、直接分析已知蛋白之间的相互作用,及分离新的与已知蛋白作用的配体及其编码基因.除上述的同仁回答外,还有其他的一些问题:假阳性较多,假阴性现象,转化效率也是关键点之一.
喻爽18049488450：
酵母双杂交系统的介绍 -
36362邹磊
： 酵母双杂交系统是将待研究的两种蛋白质的基因分别克隆到酵母表达质粒的转录激活因子(如GAL4等)的DNA结合结构域基因和转录激活因子(如GAL4等)激活结构域基因,构建成融合表达载体,从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统.
喻爽18049488450：
酵母菌双杂交到底是什么? 请解释一下 -
36362邹磊
： 100字有点困难,但是还是可以试试,如果有疑问可以追问.酵母双杂交是一种用于检测两种蛋白是否互作的一种手段.实验中将A蛋白与转录激活因子连接,B蛋白与另一个转录因子(比如RNA聚合酶的alpha亚基)融合.如果A能够和B发生互作,那么转录激活因子就可以激活报告基因的转录,从而使菌株产生某些特性(抗性或能够在基本培养基上生长),反之则不能.参考资料:http://baike.baidu.com/link?url=gzze1wAVvxbMwPcV8xUjouZsKo1gCjEVnSCm7QeV0m-3CW_1od9IqgWbY25byn91OzKfM5kGeMRah5KdaccKta
喻爽18049488450：
酵母双杂交系统的应用 -
36362邹磊
： 酵母双杂交系统能在体内测定蛋白质的结合作用,具有高度敏感性.主要是由于:①采用高拷贝和强启动子的表达载体使杂合蛋白过量表达.②信号测定是在自然平衡浓度条件下进行, 而如免疫共沉淀等物理方法为达到此条件需进行多次洗涤,降低了信号强度.③杂交蛋白间稳定度可被激活结构域和结合结构域结合形成转录起始复合物而增强,后者又与启动子DNA结合, 此三元复合体使其中各组分的结合趋于稳定.④通过mRNA产生多种稳定的酶使信号放大.同时, 酵母表型, X-Gal及HIS3蛋白表达等检测方法均很敏感.
喻爽18049488450：
酵母单双杂交? -
36362邹磊
： 酵母双杂交系统是在真核模式生物酵母中进行的,研究活细胞内蛋白质相互作用,对蛋白质之间微弱的、瞬间的作用也能够通过报告基因的表达产物敏感地检测得到,它是一种具有很高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术.大量的研究文献表明...
喻爽18049488450：
酵母双杂交的常见问题 -
36362邹磊
： 酵母双杂交系统应用中常遇到的问题一是假阳性较多,二是转化效率偏低.所谓假阳性就是:在待研究的两个蛋白间没有发生相互作用的情况下,报告基因被激活.主要原因是由于BD融合诱饵蛋白有单独激活作用,或者这种融合蛋白的激活作...
喻爽18049488450：
酵母双杂交系统原理的优点 -
36362邹磊
： 双杂交系统的另一个重要的元件是报道株.报道株指经改造的、含报道基因(reporter gene)的重组质粒的宿主细胞. 最常用的是酵母细胞, 酵母细胞作为报道株的酵母双杂交系统具有许多优点: 〈1〉 易于转化、便于回收扩增质粒. 〈2〉...
喻爽18049488450：
酵母双杂交的局限性 -
36362邹磊
： 酵母双杂交系统是分析蛋白-蛋白间相互作用的有效和快速的方法, 有多方面的应用, 但仍存在一些局限性.⑴双杂交系统分析蛋白间的相互作用定位于细胞核内, 而许多蛋白间的相互作用依赖于翻译后加工如糖基化、二硫键形成等, 这些反...
