酵母双杂交
答:因为转进去的两个质粒上具有合成两种氨基酸的基因,所以在两缺板子上能生长。如果两个蛋白能互作,报告基因被激活,所以能在三缺或四缺板子上生长,如果不能互作,就不生长。
答:酵母双杂交技术是一种在分子生物学研究中常用的技术,主要用于研究蛋白质之间的相互作用。这种技术的原理是基于真核生物的转录因子TFIID的结构,其中TFIID由TD和TBP两个亚基组成,它们之间通过一个名为helix-loop-helix的结构相互连接,形成稳定的复合物。在酵母双杂交系统中,TD和TBP被分别替换为两个目标...
答:酵母双杂交技术(YeastTwo-Hybrid)是一种用来研究蛋白质相互作用的实验技术。该技术利用酵母细胞的自身特性,使得两个蛋白质分别与介导转录激活的Gal4转录因子不同区域结合,从而激发酵母细胞内特定的报告基因(reportergene)的表达。当两个蛋白质的结合能够激活报告基因的表达,则表明这两个蛋白质之间存在...
答:注意事项 (1)酵母双杂交对照的设定 常规的酵母双杂交操作时一般会设定阳性对照、阴性对照以及显色系统对照三种对照,以MATCHMAKER GAL4酵母双杂交筛选系统为例:阳性对照:pGADT7-T + pGBKT7-53,其中T蛋白和53蛋白是已经明确在酵母细胞内能够发生结合并启动报告基因表达的两种蛋白。阴性对照:pGADT7-...
答:酵母双杂交系统(Yeast two-hybrid system)的建立是基于对真核生物调控转录起始过程的认识。细胞起始基因转录需要有反式转录激活因子的参与。反式转录激活因子,例如酵母转录因子 GAL4在结构上是组件式的(modular),往往由两个或两个以上结构上可以分开,功能上相互独立的结构域(domain)构成,其中有DNA...
答:缺色氨酸和亮氨酸的酵母合成培养基氨基酸。据分析测试百科网得知,酵母双杂交的培养基缺色氨酸和亮氨酸的酵母合成培养基氨基酸,酵母双杂交后,应用CPRG法定量测试了蛋白质相互作用。
答:用来研究蛋白质-蛋白质相互作用的实验技术是()A.酵母双杂交技术 B.原位杂交技术 C.SAGE技术 D.斑点杂交技术 正确答案:酵母双杂交技术
答:前者可识别DNA上的特异序列,并使转录激活结构域定位于所调节的基因的上游,转录激活结构域可同转录复合体的其他成分作用,启动它所调节的基因的转录。两个结构域不但可在其连接区适当部位打开, 仍具有各自的功能。而且不同两结构域可重建发挥转录激活作用。酵母双杂交系统利用杂交基因通过激活报道基因的...
答:一周。酵母双杂实验通常情况下是需要两周的时间,涂板是需要一周的时间进行发酵的。酵母是一种单细胞真菌,并非系统演化分类的单元。一种肉眼看不见的微小单细胞微生物,能将糖发酵成酒精和二氧化碳,分布于整个自然界,是一种典型的异养兼性厌氧微生物,在有氧和无氧条件下都能够存活,是一种天然发酵...
答:酵母双杂交二缺、三缺、四缺的作用如下。1、二缺:可以帮助分离染色体的配对。2、三缺:可以用于研究基因重组的机理。3、四缺:可以用于研究基因邻接检测和构建不同基因之间在空间上的位置关系。
网友评论:
姚杰18325357863:
酵母双杂交 - 百科
5078施侄
: 酵母双杂交系统是将待研究的两种蛋白质的基因分别克隆到酵母表达质粒的转录激活因子(如GAL4等)的DNA结合结构域基因和转录激活因子(如GAL4等)激活结构域基因,构建成融合表达载体,从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统.
姚杰18325357863:
酵母菌双杂交到底是什么? 请解释一下 -
5078施侄
: 100字有点困难,但是还是可以试试,如果有疑问可以追问.酵母双杂交是一种用于检测两种蛋白是否互作的一种手段.实验中将A蛋白与转录激活因子连接,B蛋白与另一个转录因子(比如RNA聚合酶的alpha亚基)融合.如果A能够和B发生互作,那么转录激活因子就可以激活报告基因的转录,从而使菌株产生某些特性(抗性或能够在基本培养基上生长),反之则不能.参考资料:http://baike.baidu.com/link?url=gzze1wAVvxbMwPcV8xUjouZsKo1gCjEVnSCm7QeV0m-3CW_1od9IqgWbY25byn91OzKfM5kGeMRah5KdaccKta
姚杰18325357863:
酵母双杂交系统到底是啥回事?有啥用 -
5078施侄
: 酵母双杂交系统由Fields和Song等首先在研究真核基因转录调控中建立 i .典型的真核生长转录因子, 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域: DNA结合结构域(DNA-binding domain)和转录激活结构域(transcription-activating ...
姚杰18325357863:
酵母双杂交系统有哪些优缺点 -
5078施侄
:[答案] 1、高敏感性.原因:①采用高拷贝和强启动子的表达载体,使融合蛋白过量表达;②激活结构域和结合结构域结合形成转录起始复合物,之后又与启动子结合,此三元复合体使融合蛋白各组分间结合更趋于稳定;③通过mRNA使信号...
姚杰18325357863:
酵母双杂交的特点 -
5078施侄
: 酵母双杂交系统的最主要的应用是快速、直接分析已知蛋白之间的相互作用,及分离新的与已知蛋白作用的配体及其编码基因.除上述的同仁回答外,还有其他的一些问题:假阳性较多,假阴性现象,转化效率也是关键点之一.
姚杰18325357863:
酵母双杂交的局限性 -
5078施侄
: 酵母双杂交系统是分析蛋白-蛋白间相互作用的有效和快速的方法, 有多方面的应用, 但仍存在一些局限性.⑴双杂交系统分析蛋白间的相互作用定位于细胞核内, 而许多蛋白间的相互作用依赖于翻译后加工如糖基化、二硫键形成等, 这些反...
姚杰18325357863:
酵母双杂交的常见问题 -
5078施侄
: 酵母双杂交系统应用中常遇到的问题一是假阳性较多,二是转化效率偏低.所谓假阳性就是:在待研究的两个蛋白间没有发生相互作用的情况下,报告基因被激活.主要原因是由于BD融合诱饵蛋白有单独激活作用,或者这种融合蛋白的激活作...
姚杰18325357863:
论述酵母双杂交技术的原理和应用情况 -
5078施侄
:[答案] 酵母双杂交技术研究进展张迪 霍克克 顾科隆 赵翔 李育阳提 要 酵母双杂交技术是一种有效的真核活细胞内研究方法,在蛋白质相互作用的研究方面得到了广泛的应用并取得了许多有价值的重要发现.作为一个完整的实验系统,...
姚杰18325357863:
酵母双杂交系统原理的应用 -
5078施侄
: 酵母双杂交系统能在体内测定蛋白质的结合作用,具有高度敏感性. 主要是由于: ①采用高拷贝和强启动子的表达载体使杂合蛋白过量表达. ②信号测定是在自然平衡浓度条件下进行, 而如免疫共沉淀等物理方法为达到此条件需进行多次洗涤,降低了信号强度. ③杂交蛋白间稳定度可被激活结构域和结合结构域结合形成转录起始复合物而增强,后者又与启动子DNA结合, 此三元复合体使其中各组分的结合趋于稳定. ④通过mRNA产生多种稳定的酶使信号放大. 同时, 酵母表型, X-Gal及HIS3蛋白表达等检测方法均很敏感.