酵母单杂筛库
答：Bendixen等人通过酵母接合型的引用，避免了两次转化操作，同时又提高了双杂交的效率。在酵母的有性生殖过程中涉及到两种配合类型：a接合型和α接合型，这两种单倍体之间接合（mating）能形成二倍体，但a接合型细胞之间或α接合型细胞之间不能接合形成二倍体。根据酵母有性生殖的这一特点，他们将文库质粒...
答：膜体系酵母双杂交载体选择攻略 膜体系酵母双杂选择载体是根据诱饵蛋白质定位的不同来选择，有利于互作蛋白相连的泛素NubG和Cub-LexA-VP16相互作用，被UBPs识别，从而启动下游报告基因表达。那么膜体系有哪些载体？具体要如何选择？下面小正给您支支招。1、膜体系有哪些诱饵载体？膜体系酵母双杂交有三种诱饵...
答：在1999年,他们首先构建了碱蓬的基因文库,开始筛库和大规模测序;同时,课题组张荃等根据人、酵母、拟南芥的基因序列设计了另一条PCR策略,终于成功克隆了目标基因——“Na+/H+逆向运转蛋白(SsNHX1)全长cDNA”,并在甜土植物拟南芥中验证了其功能,他们将所发现的基因在“基因银行”注册,申请了国家发明专利,近日一个由...
网友评论：
连翁13791181161：
筛选酵母单杂交库用的启动子一般多长 -
69726童沈
： 我遇到过这样的情况,有可能你用的agar含有微量的营养,因此4缺并不是真正意义上的4缺了,换用bacto agar就可以了还有可能是组氨酸渗透,代谢补偿途径.另外,按说嘌呤是最严格的限制因素,但是我的酵母不加嘌呤勉强还可以活,因为接种上去的培养基里有很微量的各种营养.综上,换那种贵的agar,涂板前离心,用双蒸水重悬,另外培养72小时后针尖大的菌落就忽略它吧,选择直径至少要1mm的.
连翁13791181161：
酵母单杂交的介绍 -
69726童沈
： 酵母单杂交技术是一种研究蛋白质和特定DNA序列相互作用的技术方法,主要包括四个流程即:一、筛选含有报告基因的酵母单细胞株;二、构建表达文库;三、重组质粒转化至酵母细胞;四、阳性克隆菌株的筛选.
连翁13791181161：
酵母单杂交方法分析转录激活活性的原理和过程 -
69726童沈
： 0 引言酵母单杂交(yeast one hybrid)技术是体外分析DNA与细胞内蛋白质相互作用的一种方法,通过对酵母细胞内报告基因表达状况的分析,来鉴别DNA结合位点并发现潜在的结合蛋白基因,或对DNA结合位点进行分析. 运用此技术,能筛选...
连翁13791181161：
酵母单杂交实验中cDNA文库构建试剂盒的选择及操作步骤是啥啊?
69726童沈
： 酵母单杂交法是研究特定DNA序列和蛋白质相互作用的有效手段,cDNA文库构建作为酵母单杂交实验的核心技术,那么酵母单杂交实验中cDNA文库选择什么试剂盒构建呢? 酵母单杂交体系(yeast one-hybrid system)常用于研究DNA-蛋白质...
连翁13791181161：
酵母单杂交的缺点 -
69726童沈
： 由于插入的靶元件与酵母内源转录激活因子可能发生相互作用,或插入的靶元件不需要转录激活因子就可以激活报告基因的转录,因此往往产生假阳性结果.如果酵母表达的AD融合蛋白对细胞有毒性,或融合蛋白在宿主细胞内不能稳定地表达,或融合蛋白发生错误折叠,或者不能定位于酵母细胞核内,以及融合的Gal4AD封闭了蛋白质上与DNA相互作用的位点,则都可能干扰AD融合蛋白结合于靶元件的能力,从而产生假阴性结果.
连翁13791181161：
酵母单杂交系统与酵母双杂交系统的异同点? -
69726童沈
： 酵母双(单)杂交系统:Y2H膜蛋白系统;Grow' ' n' ' Glow GFP酵母单(双)杂交系统;Grow´ n´ Glow ACE1酵母双杂交系统;Y2H膜蛋白系统cDNA文库;酵母载体;酵母菌;酵母转化和质粒提取;β -半乳糖苷酶活性检测试剂盒; 噬菌体展示:pSKAN噬菌体展示系统;Anti-plll (g3p)抗体;抗体;pSKAN8载体;pMAMPF3-PSTI4载体;Lambda PS噬菌体裂解物;Anti-hPSTI 基因文库:Y2H cDNA文库;Lambda PS基因文库;
连翁13791181161：
请问 酵母双杂筛库在四缺培养基上显蓝斑后,提取prey(猎物质粒)时应用什么培养基摇菌比较好?为什么? -
69726童沈
： 因为转进去的两个质粒上具有合成两种氨基酸的基因,所以在两缺板子上能生长.如果两个蛋白能互作,报告基因被激活,所以能在三缺或四缺板子上生长,如果不能互作,就不生长.
连翁13791181161：
酵母单杂交pabai可以不用线性化载体吗 -
69726童沈
： 酵母单杂交pabai可以不用线性化载体 酵母单杂交技术最早是1993年由Li等从酵母双杂交技术发展而来,通过对报告基因的表型检测,分析DNA与蛋白之间的相互作用,以研究真核细胞内的基因表达调控.由于酵母单杂交方法检测特定转录因子...
连翁13791181161：
酵母单杂时pgadt7载体需要线性化吗 -
69726童沈
： 不需要,因为该质粒不需要整合到基因组上.
连翁13791181161：
酵母单双杂交? -
69726童沈
： 酵母双杂交系统是在真核模式生物酵母中进行的,研究活细胞内蛋白质相互作用,对蛋白质之间微弱的、瞬间的作用也能够通过报告基因的表达产物敏感地检测得到,它是一种具有很高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术.大量的研究文献表明...
