酵母双杂交作用
答:因此,酵母单杂交系统主要用于发现转录因子与DNA结合的相互作用。双杂交系统Y2H(Yeast Two Hybrid System)是用于发现蛋白质相互作用的技术。利用了生物体细胞内天然存在的转录激活因子与其相应的DNA结合区域之间的非共价作用来实现识别蛋白质相互作用的目的。该系统通过将感兴趣的蛋白质分别与DNA绑定域(DNA-...
答:酵母菌双杂交系统(two hybrid system)是利用在酵母菌的同一细胞中共同表达不同蛋白质,以鉴定蛋白质之间相互作用的一种分析方法。这是目前用于鉴定真核生物蛋白质互作(除膜蛋白以外)的最好体系。
答:筛选药物作用位点及药物对蛋白相互作用影响酵母双杂交的报告基因能否表达在于诱饵蛋白与靶蛋白之间的相互作用。对于能够引发疾病反应的蛋白互作可以采取药物干扰的方法,阻止它们的相互作用以达到治疗疾病的目的。例如:Dengue病毒能引起黄热病、肝炎等疾病,研究发现它的病毒RNA复制与依赖于RNA的RNA聚合酶(NS5)...
答:深入解析GAL4系统酵母双杂交的奥秘 在分子生物学研究中,GAL4系统酵母双杂交(Yeast Two-Hybrid, Y2H)是一种强大的工具,用于检测和解析蛋白质之间相互作用。让我们逐一揭示其实验原理和关键步骤。原理揭秘 首先,GAL4系统的核心是真核生物中常见的转录激活因子GAL4,其结构独特,分为DNA结合域(BD, ...
答:100字有点困难,但是还是可以试试,如果有疑问可以追问。酵母双杂交是一种用于检测两种蛋白是否互作的一种手段。实验中将A蛋白与转录激活因子连接,B蛋白与另一个转录因子(比如RNA聚合酶的alpha亚基)融合。如果A能够和B发生互作,那么转录激活因子就可以激活报告基因的转录,从而使菌株产生某些特性(抗性或...
答:白质与蛋白质之间相互作用构成了细胞生化反应网络的一个主要组成部分,蛋白-蛋白互作网络与转录调控网络对调控细胞及其信号有重要意义。把原来spaces空间上的一篇蛋白质与蛋白质间相互作用研究方法转来,算是实验技巧分类目录的首篇。\x0d\x0a\x0d\x0a一、酵母双杂交系统\x0d\x0a酵母双杂交系统是...
答:酵母双杂是验证蛋白与蛋白之间的互作,酵母单杂是验证蛋白与DNA之间的互作。
答:⑵ 检测在活细胞内进行, 可以在一定程度上代表细胞内的真实情况。⑶ 检测的结果可以是基因表达产物的积累效应, 因而可检测存在于蛋白质之间的微弱的或暂时的相互作用。⑷酵母双杂交系统可采用不同组织、器官、细胞类型和分化时期材料构建cDNA文库, 能分析细胞浆、细胞核及膜结合蛋白等多种不同亚细胞部位...
答:酵母双杂交系统 真核生物转录调控因子具有组件式结构 (modular) 特征,这些蛋白往往由两个或两个以上相互独立的结构域, 其中DNA结合结构域( binding domain, BD)和转录激活结构域( activation domain, AD)是转录激活因子发挥功能所必须的。BD能与特定基因启动区结合,但不能激活基因转录,由.不同转录...
答:转录激活结构域可同转录复合体的其他成分作用, 启动它所调节的基因的转录. 二个结构域不但可在其连接区适当部位打开, 仍具有各自的功能.而且不同两结构域可重建发挥转录激活作用.酵母双杂交系统利用杂交基因通过激活报道基因的表达探测蛋白-蛋白的相互作用.主要有二类载体: a 含DNA -binding domain的载体...
网友评论:
党阙18071618008:
酵母双杂交(表达产物分析作用的系统) - 百科
55257良庾
: 酵母双杂交系统由Fields和Song等首先在研究真核基因转录调控中建立 i .典型的真核生长转录因子, 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域: DNA结合结构域(DNA-binding domain)和转录激活结构域(transcription-activating ...
党阙18071618008:
酵母双杂交系统原理的应用 -
55257良庾
: 酵母双杂交系统能在体内测定蛋白质的结合作用,具有高度敏感性. 主要是由于: ①采用高拷贝和强启动子的表达载体使杂合蛋白过量表达. ②信号测定是在自然平衡浓度条件下进行, 而如免疫共沉淀等物理方法为达到此条件需进行多次洗涤,降低了信号强度. ③杂交蛋白间稳定度可被激活结构域和结合结构域结合形成转录起始复合物而增强,后者又与启动子DNA结合, 此三元复合体使其中各组分的结合趋于稳定. ④通过mRNA产生多种稳定的酶使信号放大. 同时, 酵母表型, X-Gal及HIS3蛋白表达等检测方法均很敏感.
党阙18071618008:
酵母双杂交的特点 -
55257良庾
: 酵母双杂交系统的最主要的应用是快速、直接分析已知蛋白之间的相互作用,及分离新的与已知蛋白作用的配体及其编码基因.除上述的同仁回答外,还有其他的一些问题:假阳性较多,假阴性现象,转化效率也是关键点之一.
党阙18071618008:
酵母单杂交,双杂交,三杂交都能用来做什么 -
55257良庾
:[答案] 单杂交研究细胞内蛋白质与DNA的特定序列间的相互作用 双杂交,三杂交研究细胞内蛋白质与蛋白质之间的相互作用
党阙18071618008:
酵母双杂交系统有哪些优缺点 -
55257良庾
:[答案] 1、高敏感性.原因:①采用高拷贝和强启动子的表达载体,使融合蛋白过量表达;②激活结构域和结合结构域结合形成转录起始复合物,之后又与启动子结合,此三元复合体使融合蛋白各组分间结合更趋于稳定;③通过mRNA使信号...
党阙18071618008:
酵母双杂交系统原理的优点 -
55257良庾
: 双杂交系统的另一个重要的元件是报道株.报道株指经改造的、含报道基因(reporter gene)的重组质粒的宿主细胞. 最常用的是酵母细胞, 酵母细胞作为报道株的酵母双杂交系统具有许多优点: 〈1〉 易于转化、便于回收扩增质粒. 〈2〉...
党阙18071618008:
酵母菌双杂交到底是什么? 请解释一下 -
55257良庾
: 100字有点困难,但是还是可以试试,如果有疑问可以追问.酵母双杂交是一种用于检测两种蛋白是否互作的一种手段.实验中将A蛋白与转录激活因子连接,B蛋白与另一个转录因子(比如RNA聚合酶的alpha亚基)融合.如果A能够和B发生互作,那么转录激活因子就可以激活报告基因的转录,从而使菌株产生某些特性(抗性或能够在基本培养基上生长),反之则不能.参考资料:http://baike.baidu.com/link?url=gzze1wAVvxbMwPcV8xUjouZsKo1gCjEVnSCm7QeV0m-3CW_1od9IqgWbY25byn91OzKfM5kGeMRah5KdaccKta
党阙18071618008:
论述酵母双杂交技术的原理和应用情况 -
55257良庾
:[答案] 酵母双杂交技术研究进展张迪 霍克克 顾科隆 赵翔 李育阳提 要 酵母双杂交技术是一种有效的真核活细胞内研究方法,在蛋白质相互作用的研究方面得到了广泛的应用并取得了许多有价值的重要发现.作为一个完整的实验系统,...
党阙18071618008:
酵母双杂交 为啥一个方向有作用另一个方向没有 -
55257良庾
: 酵母双杂交系统是目前最为广泛的一种蛋白质相互作用研究方法,其中,从cDNA文库中筛选出与已知蛋白存在特异相互作用的蛋白是酵母双杂交系统最为重要和广泛的用途.酵母双杂交系统已发展成为鉴定和检测蛋白质相互作用的一种标准方法,在蛋白质相互作用关系的研究中扮演着非常重要角色.