酵母双杂mating筛库
答：7天。Y187菌株是Clontech公司开发的GAL4系统酵母单杂,双杂实验用菌株,MATα型,可直接转化质粒或与MATa型酵母菌株通过mating操作进行筛库试验。
网友评论：
包鲁19381461571：
请问 酵母双杂筛库在四缺培养基上显蓝斑后,提取prey(猎物质粒)时应用什么培养基摇菌比较好?为什么? -
16258经胆
： 因为转进去的两个质粒上具有合成两种氨基酸的基因,所以在两缺板子上能生长.如果两个蛋白能互作,报告基因被激活,所以能在三缺或四缺板子上生长,如果不能互作,就不生长.
包鲁19381461571：
酵母双杂文库筛选出互作蛋白,然后再怎么做 -
16258经胆
： 然后酵母双杂交技术检测指定蛋白对之间的相互作用. 比如: 1、诱饵蛋白表达载体 2、表达载体转化酵母的验证及自激活活性,毒性检测 3、诱饵蛋白质粒与猎物蛋白质粒共转化酵母的验证以及相互作用的检测报告 4、 无相互作用时诱饵...
包鲁19381461571：
酵母双杂交的常见问题 -
16258经胆
： 酵母双杂交系统应用中常遇到的问题一是假阳性较多,二是转化效率偏低.所谓假阳性就是:在待研究的两个蛋白间没有发生相互作用的情况下,报告基因被激活.主要原因是由于BD融合诱饵蛋白有单独激活作用,或者这种融合蛋白的激活作...
包鲁19381461571：
yeast two - hybrid screening 什么意思 -
16258经胆
： yeast two-hybrid screening 酵母菌双杂体筛选; [例句]Identification of DAT1/ LIM2-interacting proteins by yeast two-hybrid screening 利用酵母双杂交筛选与DAT1的LIM2相互作用的蛋白质
包鲁19381461571：
酵母双杂交系统的介绍 -
16258经胆
： 酵母双杂交系统是将待研究的两种蛋白质的基因分别克隆到酵母表达质粒的转录激活因子(如GAL4等)的DNA结合结构域基因和转录激活因子(如GAL4等)激活结构域基因,构建成融合表达载体,从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统.
包鲁19381461571：
构建酵母双杂 库 价格 哪家好 -
16258经胆
： 比较简单的实验,一般的大公司都可以做,而且质量有保证.小公司虽然价格便宜点,但质量不得而知.买一个库的话大概一万左右,但定做的话要贵很多,估计两万之内差不多.
包鲁19381461571：
酵母双杂交系统到底是啥回事?有啥用 -
16258经胆
： 酵母双杂交系统由Fields和Song等首先在研究真核基因转录调控中建立 i .典型的真核生长转录因子, 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域: DNA结合结构域(DNA-binding domain)和转录激活结构域(transcription-activating ...
包鲁19381461571：
如何用酵母双杂交系统探究蛋白质的功能 -
16258经胆
： 大多数双杂交系统往往同时使用两个甚至三个报道基因, 其中之一是LacZ. 这些改造后的基因在启动子区有相同的转录激活因子结合位点, 因此可以被相同的转录激活因子(如上述的Gal4蛋白)激活. 通过这种双重或多重选择既提高了检测灵...
包鲁19381461571：
酵母双杂交系统原理的应用 -
16258经胆
： 酵母双杂交系统能在体内测定蛋白质的结合作用,具有高度敏感性. 主要是由于: ①采用高拷贝和强启动子的表达载体使杂合蛋白过量表达. ②信号测定是在自然平衡浓度条件下进行, 而如免疫共沉淀等物理方法为达到此条件需进行多次洗涤,降低了信号强度. ③杂交蛋白间稳定度可被激活结构域和结合结构域结合形成转录起始复合物而增强,后者又与启动子DNA结合, 此三元复合体使其中各组分的结合趋于稳定. ④通过mRNA产生多种稳定的酶使信号放大. 同时, 酵母表型, X-Gal及HIS3蛋白表达等检测方法均很敏感.
包鲁19381461571：
谁能解释一下酵母双杂交系统的基本原理和操作流程 -
16258经胆
： 酵母双杂交系统(yeast two-hybrid system)是在酵母体内分析蛋白质-蛋白质相互作用的基因系统,也是一个基于转录因子模块结构的遗传学方法.该方法建立以来,经过不断的完善和发展,不但可以检测已知蛋白质之间的相互作用,更重要的在于发现新的与已知蛋白相互作用的未知蛋白.
