酵母筛库4缺不长
答：该单杂筛库只能用质粒。酵母单杂筛库使用质粒作为载体。在酵母单杂筛库的构建过程中，质粒常被用作载体，以便将目标DNA（被称为诱饵）插入其中。这种载体可以携带报告基因，绿色荧光蛋白（GFP），这样就可以观察荧光来判断目标DNA是否成功转入酵母菌。
答：4、蛋白结构域预测 http://smart.embl-heidelberg.de/ 三、膜体系筛库交付标准?什么样的膜体系筛库结果是合格的呢？小正带您直观体验膜体系筛库的交付金标准，以使用pBT3-STE筛选膜体系文库为例，共计七大步骤和七大结论。1、诱饵载体构建 结论1：通过一代测序比对载体是否正确。2、诱饵载体功能验证 ...
答：题主是否想询问“双杂筛库长出的酵母为什么发红”？1、本身就是红色的酵母，红酵母菌。2、培养基是红色培养基，虎红培养基。3、酵母分泌的产物是红色或产物被氧化后显红色。
答：可参考：诱饵基因转化筛库宿主菌Y190 1） 3 个1mm 克隆接种于3mlYPD 液体培养基30℃振荡培养20 小时(过夜)，OD600 达到1.2 左右。2） 将此3ml 菌液接入大体积(体积视转化个数定)YPD 中培养4 小时左右，使 培养液OD600 达到0.6。3） 50ml 离心管收集菌液(Falcon, BD)，Eppendorf Centrifuge ...
答：它们都没有补偿缺陷型酵母中所缺失的HAP5的功能,因此不是编码类似HAP5的cDNA克隆。为了弄清它们的结构,我们以GAL4和TAD4为引物进行PCR扩增。并对扩增出的cDNA顺序分别进行Sau3AⅠ酶切,根据酶切带型对各批筛出的cDNA进行归类。结果表明,17个中有6个筛出的阳性cDNA具类似酶切带型;4次筛库中有3次获得该类cDNA...
网友评论：
简菡18190404343：
筛选酵母单杂交库用的启动子一般多长 -
29311佴纪
： 我遇到过这样的情况,有可能你用的agar含有微量的营养,因此4缺并不是真正意义上的4缺了,换用bacto agar就可以了还有可能是组氨酸渗透,代谢补偿途径.另外,按说嘌呤是最严格的限制因素,但是我的酵母不加嘌呤勉强还可以活,因为接种上去的培养基里有很微量的各种营养.综上,换那种贵的agar,涂板前离心,用双蒸水重悬,另外培养72小时后针尖大的菌落就忽略它吧,选择直径至少要1mm的.
简菡18190404343：
请问 酵母双杂筛库在四缺培养基上显蓝斑后,提取prey(猎物质粒)时应用什么培养基摇菌比较好?为什么? -
29311佴纪
： 因为转进去的两个质粒上具有合成两种氨基酸的基因,所以在两缺板子上能生长.如果两个蛋白能互作,报告基因被激活,所以能在三缺或四缺板子上生长,如果不能互作,就不生长.
简菡18190404343：
酵母双杂交筛库不加3 - at有什么影响 -
29311佴纪
： 假阳性 非常多,你是 -LWH 3缺+ 3-AT 吗?
简菡18190404343：
酵母培养基的配方谁能够给我一个完整的酵母培养基(四缺SD)培养基
29311佴纪
： YPD培养基Yeast Extract 10,PePtone 20,Dextrose 20,若制固体培养基加入琼脂20,(121℃灭菌 20 分钟)
简菡18190404343：
酵母双杂文库筛选出互作蛋白,然后再怎么做 -
29311佴纪
： 然后酵母双杂交技术检测指定蛋白对之间的相互作用. 比如: 1、诱饵蛋白表达载体 2、表达载体转化酵母的验证及自激活活性,毒性检测 3、诱饵蛋白质粒与猎物蛋白质粒共转化酵母的验证以及相互作用的检测报告 4、 无相互作用时诱饵...
简菡18190404343：
酵母互作结果如果很弱该怎么办 -
29311佴纪
： 可以用protein binding的方法,先将目的蛋白纯化出来,再用连接了目的蛋白的beads或者柱子去和全细胞裂解液中可能和目的蛋白作用的蛋白富集起来,跑蛋白胶,和对照组比较有没有更深的条带.
简菡18190404343：
酵母双杂交,bait如何构建 -
29311佴纪
： 可参考:诱饵基因转化筛库宿主菌Y190 1) 3 个1mm 克隆接种于3mlYPD 液体培养基30℃振荡培养20 小时(过夜), OD600 达到1.2 左右. 2) 将此3ml 菌液接入大体积(体积视转化个数定)YPD 中培养4 小时左右,使 培养液OD600 达到0.6...
简菡18190404343：
母猪刚生完小猪就没有奶, 该怎么办? -
29311佴纪
： 母猪无乳综合症一. 奶水不足的原因:总的原因是各种内外因素 引起了内分泌失调所致.因泌乳受脑垂体的腺垂体中的嗜酸性细胞所分泌的催乳激素所调控与制约.引起母猪产后奶水不足或无奶的原因常见情况有:(一)母猪怀孕期饲养管理...
简菡18190404343：
将10毫升酵母液放在适宜温度下培养,并于不同时间内等量均匀取样4次,分别测定样品中酵母菌的数量和pH, -
29311佴纪
： (1)将10mL酵母液放在适宜温度下培养,可根据培养液pH值的变化来确定取样顺序,因为酵母菌的代谢活动消耗营养物质,不断产生CO2等代谢产物使培养液的pH值的变化来确定取样顺序,因为酵母菌的代谢活动消耗营养物质、不断产生CO2...
