酵母双杂交名词解释
答:深入解析GAL4系统酵母双杂交的奥秘 在分子生物学研究中,GAL4系统酵母双杂交(Yeast Two-Hybrid, Y2H)是一种强大的工具,用于检测和解析蛋白质之间相互作用。让我们逐一揭示其实验原理和关键步骤。原理揭秘 首先,GAL4系统的核心是真核生物中常见的转录激活因子GAL4,其结构独特,分为DNA结合域(BD, ...
答:为探究生物进程的分子机制,需要确定介导这个过程的蛋白质-蛋白质间的相互作用。研究蛋白质间相互作用的主要技术总结如下:一、酵母双杂交系统 酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法。其原理是当靶蛋白和诱饵蛋白特异结合后,诱饵蛋白结合于报道基因的启动子,启动报道 基因在酵母...
答:1. 酵母双杂交系统的建立基于对真核生物调控转录起始过程的理解。2. 该系统利用反式转录激活因子,例如酵母中的GAL4,其结构模块化,通常由具有独立功能的结构域组成,包括DNA结合域(DNA-BD)和转录激活域(DNA-AD)。3. GAL4的DNA-BD和DNA-AD在物理上分离时各自保持功能,但只有当这两个结构域在...
答:蛋白质与蛋白质之间相互作用构成了细胞生化反应网络的一个主要组成部分,蛋白-蛋白互作网络与转录调控网络对调控细胞及其信号有重要意义。一、酵母双杂交系统:酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法。其原理是当靶蛋白和诱饵蛋白特异结合后,诱饵蛋白结合于报道基因的启动子,启动...
答:酵母双杂交系统 真核生物转录调控因子具有组件式结构 (modular) 特征,这些蛋白往往由两个或两个以上相互独立的结构域, 其中DNA结合结构域( binding domain, BD)和转录激活结构域( activation domain, AD)是转录激活因子发挥功能所必须的。BD能与特定基因启动区结合,但不能激活基因转录,由.不同转录...
答:听过破镜重圆的故事吧。假如甲乙两个人各拿半块镜子,只有当他们两人在一起的时候这个镜子才可以拼成一个整个的。酵母双杂交我没做过,我的理解就是这样的:你看到的BD和AD分别是两个半块的镜子,你想研究的两个蛋白则是甲乙两个拿镜子的人。 如果你的两个蛋白能相互作用,它们手上的镜子就能拼在...
答:酵母双杂交由Fields在1989年提出. 他的产生是基于对真核细胞转录因子特别是酵母转录因子GAL4性质的研究. GAL4包括两个彼此分离的但功能必需的结构域. 位于N端1-147位氨基酸残基区段的DNA结合域(DNA binding domain,DNA-BD)和位于C端768-881 位氨基酸残基区段的转录激活域(Activation domain,AD)....
答:【答案】:是一种以酵母的遗传学分析为基础,研究反式作用因子之间相互作用对真核基因转录调控影响的实验系统。该系统由报告基因转录调控区、报告基因及一对可以相互作用的杂合反式作用因子组成。
答:Fields在1989年提出了酵母双杂交技术。这项技术的开发基于对真核生物转录因子,尤其是酵母转录因子GAL4的研究。GAL4由两个功能区域组成:N端的DNA结合域(DNA-BD)和C端的转录激活域(AD)。DNA-BD负责识别并结合到GAL4响应基因的上游激活序列(UAS),而AD则通过与转录机制中的其他组分相互作用来激活...
答:使用来鉴定蛋白与蛋白相互作用的,将两个蛋白分别与AD(activation domain)、BD(binding domain)相结合,组成融合蛋白,如果两个蛋白有相互作用,也就是靠近了,那么AD和BD也会被拉近,这样AD、BD的组合就可以激活一个基因的表达(好像是Gal,不记得了),这样通过检查这个基因是否表达就可以看出这两个...
网友评论:
阳黎15645634753:
酵母双杂交(表达产物分析作用的系统) - 百科
47780钦育
: 100字有点困难,但是还是可以试试,如果有疑问可以追问.酵母双杂交是一种用于检测两种蛋白是否互作的一种手段.实验中将A蛋白与转录激活因子连接,B蛋白与另一个转录因子(比如RNA聚合酶的alpha亚基)融合.如果A能够和B发生互作,那么转录激活因子就可以激活报告基因的转录,从而使菌株产生某些特性(抗性或能够在基本培养基上生长),反之则不能.参考资料:http://baike.baidu.com/link?url=gzze1wAVvxbMwPcV8xUjouZsKo1gCjEVnSCm7QeV0m-3CW_1od9IqgWbY25byn91OzKfM5kGeMRah5KdaccKta
阳黎15645634753:
酵母双杂交系统的介绍 -
47780钦育
: 酵母双杂交系统是将待研究的两种蛋白质的基因分别克隆到酵母表达质粒的转录激活因子(如GAL4等)的DNA结合结构域基因和转录激活因子(如GAL4等)激活结构域基因,构建成融合表达载体,从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统.
阳黎15645634753:
酵母双杂交系统到底是啥回事?有啥用 -
47780钦育
: 酵母双杂交系统由Fields和Song等首先在研究真核基因转录调控中建立 i .典型的真核生长转录因子, 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域: DNA结合结构域(DNA-binding domain)和转录激活结构域(transcription-activating ...
阳黎15645634753:
谁能解释一下酵母双杂交系统的基本原理和操作流程 -
47780钦育
: 酵母双杂交系统(yeast two-hybrid system)是在酵母体内分析蛋白质-蛋白质相互作用的基因系统,也是一个基于转录因子模块结构的遗传学方法.该方法建立以来,经过不断的完善和发展,不但可以检测已知蛋白质之间的相互作用,更重要的在于发现新的与已知蛋白相互作用的未知蛋白.
阳黎15645634753:
酵母单双杂交? -
47780钦育
: 酵母双杂交系统是在真核模式生物酵母中进行的,研究活细胞内蛋白质相互作用,对蛋白质之间微弱的、瞬间的作用也能够通过报告基因的表达产物敏感地检测得到,它是一种具有很高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术.大量的研究文献表明...
阳黎15645634753:
想知道酵母双杂交到底咋回事啊,看了半天书,晕,也看不明白,希望能用简单明了的通俗话帮我解释一下 -
47780钦育
: 听过破镜重圆的故事吧.假如甲乙两个人各拿半块镜子,只有当他们两人在一起的时候这个镜子才可以拼成一个整个的.酵母双杂交我没做过,我的理解就是这样的:你看到的BD和AD分别是两个半块的镜子,你想研究的两个蛋白则是甲乙两个拿镜子的人. 如果你的两个蛋白能相互作用,它们手上的镜子就能拼在一起,也就是BD和AD可以结合, 它们结合以后,就形成了一个完整的镜子:呈现完整的GAL4转录因子活性并可激活UAS下游启动子,使启动子下游基因LacZ得到转录而报告出来...
阳黎15645634753:
酵母双杂交的特点 -
47780钦育
: 酵母双杂交系统的最主要的应用是快速、直接分析已知蛋白之间的相互作用,及分离新的与已知蛋白作用的配体及其编码基因.除上述的同仁回答外,还有其他的一些问题:假阳性较多,假阴性现象,转化效率也是关键点之一.
阳黎15645634753:
酵母双杂交系统原理的应用 -
47780钦育
: 酵母双杂交系统能在体内测定蛋白质的结合作用,具有高度敏感性. 主要是由于: ①采用高拷贝和强启动子的表达载体使杂合蛋白过量表达. ②信号测定是在自然平衡浓度条件下进行, 而如免疫共沉淀等物理方法为达到此条件需进行多次洗涤,降低了信号强度. ③杂交蛋白间稳定度可被激活结构域和结合结构域结合形成转录起始复合物而增强,后者又与启动子DNA结合, 此三元复合体使其中各组分的结合趋于稳定. ④通过mRNA产生多种稳定的酶使信号放大. 同时, 酵母表型, X-Gal及HIS3蛋白表达等检测方法均很敏感.
阳黎15645634753:
酵母双杂交 - 酵母双杂交两种菌杂交效率不高有哪些原因?
47780钦育
: 酵母双杂交技术研究进展 张迪 霍克克 顾科隆 赵翔 李育阳 提 要 酵母双杂交技术是一种有效的真核活细胞内研究方法,在蛋白质相互作用的研究方面得到了广泛的应用并取...