如何测定DPPH的抗氧化能力？
DPPH（2,2-二苯基-1-苦味肼）是一种常用的自由基，被广泛用于评估化合物的抗氧化能力。以下是测定DPPH抗氧化能力的常见方法：1、DPPH吸收光谱测定法：通过测量化合物与DPPH反应后的溶液吸收光谱的变化来评估其抗氧化能力。在波长515 nm处，DPPH的吸收峰为最大。当化合物具有较强的抗氧化能力时，它会与DPPH中的自由基发生反应，导致DPPH的吸收减弱。溶液中化合物的浓度越高，吸收下降的越多。
2、DPPH消退法：将DPPH与待测化合物混合，并测量混合物的吸收变化。DPPH溶液呈深紫色，在与抗氧化物质接触后会逐渐变为淡黄色。通过测量混合物的吸收率变化，可以评估化合物的抗氧化能力。吸收率降低的程度与化合物的抗氧化能力成正比。
3、DPPH减色法：将DPPH与待测化合物反应一段时间后，测量混合物的吸光度变化。DPPH的浓度越高，呈深紫色的程度越大。当化合物具有较强的抗氧化能力时，它会与DPPH发生反应导致其浓度降低，从而减弱深紫色的程度。通过测量吸光度的变化，可以评估化合物的抗氧化能力。
在测定DPPH的抗氧化能力时，可以使用甲醇或其他适量的有机溶剂来溶解DPPH试剂。用于调零的溶液通常也是相同的有机溶剂，以确保在测量过程中不会影响DPPH产生自由基反应。
如果使用甲醇作为DPPH试剂的溶剂，则可以使用纯甲醇或50%甲醇水溶液来调零。将甲醇或甲醇水溶液移至比色皿中，并进行光密度测量。根据实际情况选择调零后需要减去的吸光度值，一般建议在0.1以下。
需要注意的是，在测定DPPH抗氧化能力时，还要对所有试剂和标准品进行预实验，以确定最佳的浓度范围和适当的稀释倍数，以避免误差和结果的不可靠性。
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