酵母双杂交实验
答：具体实验步骤如下：1.构建酵母表达载体：将含有自身复制元件2μ、酵母转录起始序列、选择性筛选的标记基因等元件的酵母表达载体与感兴趣的蛋白质基因融合，在表达载体中得到融合基因。2.构建Gal4转录因子启动子激活报告基因的表达载体：将报告基因与Gal4转录因子启动子串联，在表达载体中得到表达Gal4转录因子...
答：酵母双杂交的操作步骤如下：1.构建酵母双杂交载体 首先需要构建酵母双杂交载体，该载体包含两个重要的部分：一个携带蛋白质结构域的DNA结合域和一个携带转录激活域的DNA结合域。2.将两个蛋白质结构域克隆到载体中 将两个蛋白质结构域克隆到载体中，一个蛋白质结构域与转录激活域相连，另一个蛋白质结构...
答：把原来spaces空间上的一篇蛋白质与蛋白质间相互作用研究方法转来，算是实验技巧分类目录的首篇。\x0d\x0a\x0d\x0a一、酵母双杂交系统\x0d\x0a酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法。其原理是当靶蛋白和诱饵蛋白特异结合后，诱饵蛋白结合于报道基因的启动子，启动报道...
答：酵母双杂交技术的价值主要体现在以下几个方面：1、研究蛋白质之间的相互作用：酵母双杂交技术可以用于研究蛋白质之间的相互作用，这对于理解蛋白质的功能和生物学过程具有重要意义。2、发现新的蛋白质相互作用：通过酵母双杂交技术，研究人员可以发现新的蛋白质相互作用，这有助于揭示新的生物学机制和疾病病理...
答：注意事项 （1）酵母双杂交对照的设定 常规的酵母双杂交操作时一般会设定阳性对照、阴性对照以及显色系统对照三种对照，以MATCHMAKER GAL4酵母双杂交筛选系统为例：阳性对照：pGADT7-T + pGBKT7-53，其中T蛋白和53蛋白是已经明确在酵母细胞内能够发生结合并启动报告基因表达的两种蛋白。阴性对照：pGADT7-...
答：在双杂交实验中，我们将两个待测蛋白分别融合到BD和AD的载体上，如Bait（诱饵）和Prey（猎物）载体。当这两种融合蛋白在酵母细胞内共表达时，如果两者之间发生相互作用，AD和BD会结合形成一个完整的GAL4复合体，进而激活特定的报告基因表达。通过观察报告基因表达的变化，我们便能推断出两个蛋白之间的相互...
答：酵母双杂交是常用的蛋白质相互作用研究方法，其中诱饵bait和靶标prey蛋白质通过特定的载体表达系统与每个目标蛋白质进行相互作用实验。以下是构建酵母双杂交诱饵载体的一般步骤：选择适当的酵母双杂交系统：常用的酵母双杂交系统包括Gal4系统和LexA系统。选择适合你实验需要的系统。设计诱饵序列：诱饵是你感兴趣...
答：酵母双杂交法的原理：典型的真核生物转录因子， 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域： DNA结合结构域(DNA-binding domain)和转录激活结构域(transcription-activating domain)。前者可识别DNA上的特异序列， 并使转录激活结构域定位于所调节的基因的上游， 转录激活结构域可同转录复合体的其他成分...
答：酵母双杂交系统 真核生物转录调控因子具有组件式结构 (modular) 特征，这些蛋白往往由两个或两个以上相互独立的结构域， 其中DNA结合结构域( binding domain， BD)和转录激活结构域( activation domain， AD)是转录激活因子发挥功能所必须的。BD能与特定基因启动区结合，但不能激活基因转录，由.不同转录...
答：是酵母遗传学、细胞与分子生物学实验室的最佳选择，泛基诺产品驰名全国，享誉世界，其酵母选择营养培养基/缺素培养基广泛应用于酵母遗传、基因工程以及工具方法学（酵母双杂交、酵母单杂交）和动物、植物基因功能互补实验等的研究中，涵盖酵母研究的一切主要方面和一切主要过程。分类导航：营养缺陷型标记基因的...
网友评论：
艾药17742958897：
酵母菌双杂交到底是什么? 请解释一下 -
51522贡刮
： 100字有点困难,但是还是可以试试,如果有疑问可以追问.酵母双杂交是一种用于检测两种蛋白是否互作的一种手段.实验中将A蛋白与转录激活因子连接,B蛋白与另一个转录因子(比如RNA聚合酶的alpha亚基)融合.如果A能够和B发生互作,那么转录激活因子就可以激活报告基因的转录,从而使菌株产生某些特性(抗性或能够在基本培养基上生长),反之则不能.参考资料:http://baike.baidu.com/link?url=gzze1wAVvxbMwPcV8xUjouZsKo1gCjEVnSCm7QeV0m-3CW_1od9IqgWbY25byn91OzKfM5kGeMRah5KdaccKta
艾药17742958897：
酵母双杂交实验有哪些注意事项 -
51522贡刮
： 如果诱饵蛋白对酵母细胞是有毒的,该怎么办?在某些情况下,在液体培养基中培养不好的菌珠可以在固体培养基上生长得很好.首先重悬克隆于1ml的SD/–Trp,接着将重悬液平铺于5 个100-mm的SD/–Trp平板,在30℃下温浴,直至平板上的克隆相互粘在一起.用5ml 0.5X YPDA刮下每块板上的克隆,并收集到一管中,这样就可以使用这个细胞重悬液进行正常的杂交反应.2.如果诱饵蛋白能直接激活报告基因的表达,该如何处理?该蛋白很可能有转录激活域,是个转录因子.可以通过基因重组切掉转录激活域,然后重新检测其是否自激活,但要注意重组也有可能破坏蛋白之间的互作.
艾药17742958897：
酵母双杂交的具体过程是什么?(中文)
51522贡刮
： 菌株与质粒AH109酵母菌株(MATa,trp1. 901,leu2—3,112,ura3-52,his3-200,gal4A,gal8O~X, LYS2::G地1U^s-GALlT^T^-HIS3, G U^s—GAI2T^T^- ADE2,URA3::h吐1U^s.h吐1T^T^.1acZ),YM187酵母 菌株(NATQ,um3-52,his3-200,ade2—101,trpl-...
艾药17742958897：
酵母双杂交的常见问题 -
51522贡刮
： 酵母双杂交系统应用中常遇到的问题一是假阳性较多,二是转化效率偏低.所谓假阳性就是:在待研究的两个蛋白间没有发生相互作用的情况下,报告基因被激活.主要原因是由于BD融合诱饵蛋白有单独激活作用,或者这种融合蛋白的激活作...
艾药17742958897：
酵母双杂交体系克隆基因的原理和方法 -
51522贡刮
： 酵母双杂交是验证蛋白质相互作用的实验体系,不是用来克隆基因的.如果你需要酵母双杂的相关资料,请留下你的邮箱.
艾药17742958897：
如何用酵母双杂交系统探究蛋白质的功能 -
51522贡刮
： 大多数双杂交系统往往同时使用两个甚至三个报道基因, 其中之一是LacZ. 这些改造后的基因在启动子区有相同的转录激活因子结合位点, 因此可以被相同的转录激活因子(如上述的Gal4蛋白)激活. 通过这种双重或多重选择既提高了检测灵...
艾药17742958897：
酵母双杂交的局限性 -
51522贡刮
： 酵母双杂交系统是分析蛋白-蛋白间相互作用的有效和快速的方法, 有多方面的应用, 但仍存在一些局限性.⑴双杂交系统分析蛋白间的相互作用定位于细胞核内, 而许多蛋白间的相互作用依赖于翻译后加工如糖基化、二硫键形成等, 这些反...
艾药17742958897：
酵母单双杂交? -
51522贡刮
： 酵母双杂交系统是在真核模式生物酵母中进行的,研究活细胞内蛋白质相互作用,对蛋白质之间微弱的、瞬间的作用也能够通过报告基因的表达产物敏感地检测得到,它是一种具有很高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术.大量的研究文献表明...
艾药17742958897：
谁能解释一下酵母双杂交系统的基本原理和操作流程 -
51522贡刮
： 酵母双杂交系统(yeast two-hybrid system)是在酵母体内分析蛋白质-蛋白质相互作用的基因系统,也是一个基于转录因子模块结构的遗传学方法.该方法建立以来,经过不断的完善和发展,不但可以检测已知蛋白质之间的相互作用,更重要的在于发现新的与已知蛋白相互作用的未知蛋白.
艾药17742958897：
酵母双杂交 - 酵母双杂交两种菌杂交效率不高有哪些原因?
51522贡刮
： 酵母双杂交技术研究进展 张迪 霍克克 顾科隆 赵翔 李育阳 提 要 酵母双杂交技术是一种有效的真核活细胞内研究方法,在蛋白质相互作用的研究方面得到了广泛的应用并取...
